[发明专利]一种金线莲苷的分离纯化方法及其在舒缓化妆品中的应用

说明书

一种金线莲苷的分离纯化方法及其在舒缓化妆品中的应用,采用RAW264.7细胞模型从金线莲中筛选出具有抑制NO释放的金线莲提取物,主要成分为金线莲苷，并设计并优化了该提取物的制备方法；同时，该提取物能抑制因辣椒素刺激引起的人胚肾细胞上TRPV1的激活，减少炎症介质引起的细胞钙离子内流，避免引发相应的生理变化等，进一步证明该提取物具有舒缓功效。

技术领域

本发明属于天然植物活性成分提取分离转化及应用技术领域，具体涉及一种具有舒缓功效的金线莲提取物的制备方法和应用。

背景技术

金线莲是金线兰的俗称，为兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus) 植物，目前国内已发现的该属植物有17种以上。金线莲主产于福建，为福建省道地药材。

据《新华本草纲要》记载，金线莲全草可入药，味甘、性平，具有凉血平肝、清热解毒的功效。

目前，金线莲已经被国家食品药品监督管理局批准为食品，因此其在食品、保健食品领域具有广泛的市场。但金线莲在化妆品领域的应用和研究相对较少。中国专利CN2017106813818采用水提、醇萃等方法获得金线莲提取物，该提取物能抑制黑色素，可作为化妆品美白功效原料。CN2016107666883提出一种金线莲黄酮的分离纯化工艺，并指出该黄酮具有抗氧化活性和抑制酪氨酸酶活性。

敏感性皮肤(sensitive skin)特指皮肤在生理或病理条件下出现的一种高反应状态，可表现有灼热、刺痛、瘙痒及紧绷感等主观症状，伴或不伴红斑、毛细血管扩张及脱屑等客观体征。近些年来，随着人们对外在形象越来越重视，有意识地加强了对自己皮肤的清洁和护理，但过度的清洁皮肤和不恰当的使用化妆品容易诱发敏感性皮肤，敏感性皮肤发生率有上升的趋势。另外，加班熬夜、精神紧张等生理应激会增加肾上腺皮质酮的分泌，而肾上腺皮质酮会被皮肤组织中的酶转化为皮质醇(内源性糖皮质激素)，该激素短期内能减少皮肤炎症，但同时也降低皮肤免疫力和修复能力，进而发展为敏感性皮肤。[i]

国内外研究认为敏感性皮肤的发生与皮肤屏障受损后神经末梢受到外界刺激，分布于感觉神经末梢、角质形成细胞及肥大细胞的瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)，角质形成细胞表面会表达一些能够感觉到温度、疼痛等的受体如 TRP类。如TRPV1，TRPV1通过两种方式引发神经反应，一方面通过电信号传入到神经中枢，从而产生刺痛感、瘙痒等症状，另一方面TRPV1激活所引发的钙离子内流也会引发神经性炎症，最终导致皮肤泛红、出现红斑等症状。[ii]因此，TRPV1可以用于评价具有舒缓功效的化妆品原料。

另外，敏感性皮肤本质上也是一种炎症反应，而NO在炎症和免疫应答中起着关键的调节作用。在免疫系统中，NO的合成是巨噬细胞被激活的重要标志，也是巨噬细胞产生病理和免疫效应的重要步骤，人体巨噬细胞在炎性疾病情况下能够产生NO，抑制或者杀伤病原微生物，同时可在B淋巴细胞和T淋巴细胞参与下进行炎症免疫反应，进而引发一序列生理症状。因此，常用抑制NO的释放来筛选和评价抗炎抗敏活性原料。

金线莲苷在金线莲中含量很高(可达25％)且易溶于水，非常方便提取。但金线莲也含有的黄酮、色素、无机盐、植物多糖等，其中色素、无机盐会影响其在化妆品中的使用。另外金线莲苷具有较为脆弱的内酯环结构和C-O糖苷结构，在高温或强酸强碱条件下很容易发生水解，因此，对其提取纯化工艺参数有一定限制。

中国专利2015105110163采用石油醚索提、甲醇索提、D101粗分、硅胶柱细分、D101纯化等工艺可以获得纯度大于95％的金线莲苷，该工艺复杂且用到甲醇、氯仿等有毒溶剂。

文献[iii]公开了利用联合ODS和硅胶柱分离金线莲苷的方法，但该方法难以放大且工艺成本昂贵。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种金线莲苷的分离纯化方法及其在舒缓化妆品中的应用。

为实现上发明目的，本发明采用如下技术方案：