[发明专利]一种N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原、其制备方法及含有该重组抗原的试剂盒

权利要求书

1.一种N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原，其特征在于，所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原包括亚单位GluN1a重组蛋白，所述的亚单位GluN1a重组蛋白的氨基酸序列为：将SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中第22位半胱氨酸突变为丝氨酸，第61位天冬酰胺、第350位天冬酰胺、第471位天冬酰胺和第771位天冬酰胺突变为谷氨酰胺，第595位谷氨酸和第597位谷氨酸突变为丝氨酸，第598位谷氨酸突变为苏氨酸后的氨基酸序列，

所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原还包括亚单位GluN2A重组蛋白和/或亚单位GluN2B重组蛋白，

所述的亚单位GluN2A重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，

所述的亚单位GluN2B重组蛋白的氨基酸序列为：将SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中第348位天冬酰胺突变为天冬氨酸，第838位半胱氨酸和第849位半胱氨酸突变为丝氨酸后的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸包括编码所述的亚单位GluN1a重组蛋白的核苷酸片段和编码所述的亚单位GluN2A重组蛋白的核苷酸片段，

或，所述的多核苷酸包括编码所述的亚单位GluN1a重组蛋白的核苷酸片段和编码所述的亚单位GluN2B重组蛋白的核苷酸片段，

或，所述的多核苷酸包括编码所述的亚单位GluN1a重组蛋白的核苷酸片段、编码所述的亚单位GluN2A重组蛋白的核苷酸片段和编码所述的亚单位GluN2B重组蛋白的核苷酸片段。

3.含有权利要求2所述的多核苷酸的表达载体。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述的载体为能够在昆虫细胞中表达的载体，和/或，所述的表达载体为杆状病毒。

5.含有权利要求2所述的多核苷酸或权利要求3或4所述的表达载体的细胞株。

6.根据权利要求5所述的细胞株，其特征在于，所述的细胞株采用能够转染杆状病毒并表达蛋白的昆虫细胞。

7.一种如权利要求1所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原的制备方法，其特征在于，所述的制备方法为：在细胞中同时表达所述的亚单位GluN1a重组蛋白和所述的亚单位GluN2A重组蛋白，或在细胞中同时表达所述的亚单位GluN1a重组蛋白和所述的亚单位GluN2B重组蛋白，或在细胞中同时表达所述的亚单位GluN1a重组蛋白、所述的亚单位GluN2A重组蛋白和所述的亚单位GluN2B重组蛋白。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，培养权利要求5所述的细胞株得到细胞培养液，然后经分离、纯化得到所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原。

9.一种用于检测抗N-甲基-D-天冬氨酸受体抗体或用于检测与抗N-甲基-D-天冬氨酸受体抗体阳性相关的疾病的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求1所述的N-甲基-D-天冬氨酸受体重组抗原。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒为化学发光检测试剂盒；

和/或，所述的试剂盒的检测样本类型为血清、血浆或脑脊液中的一种或多种；

和/或，所述的与抗N-甲基-D-天冬氨酸受体抗体阳性相关的疾病为自身免疫性脑炎。