[发明专利]一种获取无菌小鼠的方法

说明书

本发明公开了一种获取无菌小鼠的方法，涉及实验动物科学领域。通过体外受精获得受精卵，将发育成熟的受精卵通过胚胎移植技术移植到雌鼠的输卵管中，从而获得原雌鼠哺育的本源鼠仔，由此避免了代乳时鼠仔需要对供体雌鼠的适应期长(仔鼠进行母鼠识别)等问题的发生，提升了小仔的成活率。本发明提供的方法借助无菌传递窗将胚胎和受体假孕雌鼠传至无菌隔离包中，在无菌隔离包中实验胚胎的无菌转移，从而极大程度上避免了污染现象的发生。

技术领域

本发明涉及实验动物科学领域，具体而言，涉及一种获取无菌小鼠的方法。

背景技术

目前获取无菌小鼠的方法包括如下步骤，流程参照图1所示：(1)根据目标小鼠的品系规定，在SPF生产规模种群中根据母鼠上次生仔日期寻找孕鼠，并通过摸胎技术对孕鼠子宫内的小仔转态做一个判断，选择适合的孕鼠；(2)、准备好剖腹产手术所需要的手术器械、准备好热水、制作并安装好渡槽，提前打开电热板；(3)、通过进一步摸胎技术发现孕鼠子宫内小仔状态最佳的时候准备开始剖腹产，配置39℃左右3％过氧乙酸；(4)、然后取出孕鼠子宫通过渡槽传入到无菌手术包救仔；(5)、等待小仔呼吸平稳，准备传入已经选择代乳的隔离包内代乳或授乳包内人工授乳；(6)、1周后对已获得小仔隔离包进行微生物检测，合格后继续饲养。

现有的获取无菌小鼠方法需要通过剖腹产来完成，存在供体数少、剖腹产代乳难、污染率高、小仔成活率低等问题。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种获取无菌小鼠的方法以解决上述技术问题。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种获取无菌小鼠的方法，其包括：处死超排后的雌鼠和雄鼠，获得输卵管和附睾，取出卵子和精子体外受精后进行平衡并制备胚胎，通过无菌传递窗将胚胎和受体假孕雌鼠传入无菌隔离包内，吸取胚胎使其进入受体假孕雌鼠的输卵管，然后将携带胚胎的受体假孕雌鼠传入饲养包进行饲养。

发明人提供了一种获取无菌小鼠的方法，通过体外受精获得受精卵，将发育成熟的受精卵通过胚胎移植技术移植到雌鼠的输卵管中，从而获得原雌鼠哺育的本源鼠仔，由此避免了代乳时鼠仔需要对供体雌鼠的适应期长(仔鼠进行母鼠识别)等问题的发生，提升了小仔的成活率。本发明提供的方法借助无菌传递窗将胚胎和受体假孕雌鼠传至无菌隔离包中，在无菌隔离包中实验胚胎的无菌转移，从而极大程度上避免了污染现象的发生。

此外，本发明提供的方法也极大程度上精简了繁冗的受精卵获取步骤和胚胎转移步骤，从整体上提高了无菌小鼠的获取效率。本发明提供的方法也无须繁复的摸肽确认孕鼠子宫内小仔状态，无须为剖宫产选择最佳的剖宫时机，从根本上删减了胚胎转移前的剖宫处理步骤。本领域的技术人员借助本发明提供的方法可以更快捷的实现雌鼠中受精卵的收集，避免了由于剖宫时机不当造成小仔存活率低，也打破了供体数目对于无菌小鼠获取的技术上的限制，采用本发明提供的方法，本领域的技术人员可以直接取自然受精交配的受精卵进行体外培养，成熟后的受精卵直接无菌条件下胚胎移植到受体雌鼠的输卵管中，产仔后也无需寻找新的雌鼠进行哺乳，极大程度上提升了无菌小仔成活率。而无菌小鼠成活率地提升对于生命科学领域的基础研究具有重要意义。

本发明的目的在于：解决传统无菌净化小鼠只能通过剖腹产来完成，同时还解决了在新品系的获取时供体数少、剖腹产代乳难、污染率高、小仔成活率低等问题。

本发明提供的方法也可用于濒危动物资源的种质保存和快速建群。为净化种群的快速建立提供了捷径。

在其他实施方式中，也可以采用自然交配后获取的胚胎，通过无菌传递窗将胚胎和受体假孕雌鼠传入无菌隔离包内，进行后续胚胎进入输卵管、饲养。

在本发明应用较佳的实施方式中，选择雌鼠进行超排获得卵子，选择雄鼠获得精子然后通过体外授精的方法获得受精卵；在显微镜下用胚胎体外操作液和含双抗的DPBS溶液清洗受精卵；清洗后将受精卵移入胚胎培养液平衡。