[发明专利]一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法

说明书

本发明属于食品检测领域，公开了一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法。该方法通过1％乙酸乙腈溶液提取，正己烷净化，利用液相色谱三重四级杆质谱法测定，以空白样品基质配标，保留时间和离子碎片丰度比定性，同位素内标法定量。该方法处理样品方式简单、分析速度快、灵敏度高、成本低、使用试剂少，对环境友好，采用同位素内标法定量减少基质效应及前处理过程目标物损耗对测定结果的影响，适用于动物源性食品中咪多卡的检测。为以后关于动物源性食品中咪多卡的检测提供重要的理论依据。

技术领域

本发明属于食品检测领域，特别涉及一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法。

背景技术

咪多卡(Imidocartb，IMDP)又称咪唑苯脲或双脒苯脲，化学名为N,N'-二[3-(4,5-二氢-1H-咪唑-2-基)苯基]脲，分子式为C₁₉H₂₀N₆O，属苯氨基类衍生物之一，具有疗效高、毒性低、剂量小的特点。本品有二盐酸盐和二丙酸盐两种形式，为新型抗梨形虫药物，对多种巴贝斯虫、梨形虫均有良好的治疗效果。由于二盐酸盐具有较强的局部刺激性，临床上使用较多的是二丙酸咪唑苯脲，目前，该药已广泛应用于世界各地，为国际公认的最佳抗梨形虫药物，是美国药典唯一收录的应用于梨形虫病的治疗药物。因静脉注射毒性最大，一般采用肌肉或皮下注射两种给药方式。在动物体内，该药的主要蓄积器官是肝脏与肾脏，心脏与肌肉次之，脑残留量也很高，可能产生一定的神经毒性。欧盟药品管理局(EMEA)报道的牛各组织中咪多卡最高残留限量(MRL)为:牛奶和脂肪0.05μg/g,肌肉0.3μg/g,肾脏1.5μg/g,肝脏2μg/g。我国GB 31650-2019规定牛各组织中咪唑苯脲最高残留限量(MRL)为:牛奶和脂肪50μg/kg,肌肉300μg/kg,肾脏2000μg/kg,肝脏1500μg/kg。

查阅相关文献，目前咪多卡残留检测方法少见报道，近期有报道采用高亲和力单克隆抗体的免疫层析法测定。报道的检测方法中高效液相色谱法较为常用，但由于受到其检测器的限制，该方法不能提供结构信息，而在实际样品分析时，动物源性样品含有脂肪、蛋白质、矿物质等基质容易干扰测定而产生假阳性、假阴性现象。有采用高效液相色谱-质谱法对乳制品中咪多卡进行测定的方法，但是改方法只针对乳制品检测方法的研究，无法满足其他动物源性食品中咪多卡检测需要。也有采用液相法测定、液质法定性的方法，该方法不能一次性准确定量并定性，原因可能是在质谱分析中基质效应会影响质谱的准确定量。而采用高亲和力单克隆抗体的免疫层析法测定需用到特异特性的单克隆抗体，目前对于检测不易满足。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法。

本发明的目的通过下述方案实现：

一种液相色谱串联质谱法检测动物源性食品中咪多卡的残留量的方法，其通过正己烷净化，基质配标并内标法定量的液相色谱质谱联用仪测定动物源性食品中咪多卡的残留量。

优选的，一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法，通过乙腈体系提取，正己烷净化，利用液相色谱三重四级杆质谱法测定，以空白样品基质配标，保留时间和离子碎片丰度比定性，同位素内标法定量。

更优选的，一种液相色谱串联质谱法检测动物性食品中咪多卡的残留量的方法，具体包括以下步骤：

(1)提取：向待测动物源性食品中加入内标物质，然后再加入提取液进行提取，将所得提取液氮吹至干，待净化；

(2)净化：向步骤(1)中待净化的产物中加入溶解液，溶解之后再加净化液正己烷进行净化，取净化后的清液，过0.22μm滤膜后装瓶，得到待测样品液；

(3)空白基质样品液的制备：去掉步骤(1)中“加入内标物质溶液”的操作，然后按修改后的步骤(1)和步骤(2)对不含有咪多卡的动物源性食品进行提取和净化，即得到空白基质样品液；