[发明专利]一种靶向miR-493/HIF-1α/PDK1制备药耐药性药物的应用

说明书

本发明公开了一种靶向miR‑493/HIF‑1α/PDK1制备药耐药性药物的应用，miR‑493、HIF‑1α和PDK1在制备治疗铬暴露导致的肺癌药物中的应用，包括miR‑493、HIF‑1α和PDK1在制备治疗铬暴露导致的肺癌药物中的应用，所述治疗铬暴露导致的肺癌药物包含靶向miR‑493、HIF‑1α和PDK1的药物、载体和助剂，所述逆转肿瘤多药耐药性药物可制备成片剂、颗粒、胶囊或溶液形态，所述肿瘤耐药性检测包括以miR‑493、HIF‑1α和PDK1为靶点或者以下游主要调控分子为靶点的检测试剂或检测试剂盒，本发明通过体外和体内实验，从功能、细胞、蛋白等多个水平进行实验，证明靶向miR‑493、HIF‑1α和PDK1介导铬暴露引起的肺癌的发生发展。

技术领域

本发明涉及生物制药以及肿瘤耐药性检测应用技术领域，具体涉及一种靶向miR-493/HIF-1α/PDK1制备药耐药性药物的应用。

背景技术

铬广泛存在于自然界，其存在的主要形式分别为三价铬和六价铬，其中六价铬Cr(VI)具有毒性，Cr(VI)的产生大部分源于工业生产，如不锈钢生产、焊接、镀铬、颜料和染料以及铬酸盐化合物等，诱发的癌症有肺癌、鼻癌和鼻窦癌等。目前，Cr(VI)已被国际癌症研究机构(IARC)确认为I类致癌物。Cr(VI)可通过等电和等结构阴离子转移通道进入细胞，在细胞中Cr(VI)被还原成三价铬，三价铬可与核酸和蛋白质形成稳定的络合物，导致DNA损伤且干扰DNA修复，从而诱导癌症的发生。相关研究报道，Cr(VI)致癌的机制包括Cr(VI)诱导的氧化应激、DNA损伤和调控表观遗传修饰等。基于已有的Cr(VI)的致癌机制，有研究表明Cr(VI)可通过调节关键信号通路、microRNA失调、组蛋白修饰和DNA甲基化等影响癌症的发生发展。

微小RNAs(microRNAs、miRNAs)是约为21-22个核苷酸长的非编码RNA家族，通过与靶基因的3’非翻译区(3’-UTR)中的互补序列结合，调控靶基因的转录。miRNAs通过抑制靶基因的表达进而调控肿瘤的发生发展。研究表明，miR-143通过调节IL-6/HIF-1α及其下游信号通路抑制CrT细胞的增殖和血管生成，即Cr(VI)能够导致miRNAs的失调从而调控细胞的恶性转化。以往研究中，miR-493的表达水平在肝癌、大肠癌、舌鳞癌、肺癌及结直肠癌等癌症中显著降低。

有研究表明丙酮酸脱氢激酶1(PDK1)在乳腺癌、卵巢癌、胶质瘤、大肠癌和胃癌等多种人类恶性肿瘤中的表达水平显著升高，并调控肿瘤细胞的发生发展，且是糖酵解过程中的主要调控分子。PDK1是PDK家族的一员，是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是磷酸化和失活丙酮酸脱氢酶(PDH)E1α的主要成员。PDK1抑制PDH A1，阻断丙酮酸生成乙酰辅酶A，无法进入TCA循环量，而促使丙酮酸主要转化为乳酸。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是一种转录因子，在肿瘤的发生发展中起重要作用，在多种肿瘤中显著高表达。

我们的研究发现，人肺支气管上皮细胞BEAS-2B(B2B)经Cr(VI)长期诱导后得到的人肺支气管上皮恶性转化的细胞BEAS-Cr(CrT)，其与B2B细胞相比，丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)的表达水平显著升高。CrT细胞中糖酵解水平较B2B细胞显著升高。同时miR-493在CrT细胞中较B2B细胞表达水平显著降低，且miR-493的低表达介导了HIF-1α和PDK1的表达水平升高。本研究通过探究PDK1、miR-493和HIF-1α对CrT细胞的葡萄糖摄取、乳酸产生、细胞增殖、细胞迁移和克隆形成等生物学功能的影响，为铬接触职业病的早期诊断和预防癌变提供新思路。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种靶向miR-493/HIF-1α/PDK1制备药耐药性药物的应用，包括miR-493、HIF-1α和PDK1在制备治疗铬暴露导致的肺癌药物中的应用。

优选的：所述治疗铬暴露导致的肺癌药物包含靶向miR-493、HIF-1α和PDK1的药物、载体和助剂。

优选的：所述逆转肿瘤多药耐药性药物可制备成片剂、颗粒、胶囊或溶液形态。