[发明专利]一种用于检测HBsAg抗原蛋白的组合物及其使用方法

说明书

本发明公开了一种用于检测HBsAg抗原蛋白的组合物，包括钙钛矿荧光复合物与四氧化三铁磁性颗粒；所述钙钛矿荧光复合物用于与第一抗体结合，提供荧光型号；所述四氧化三铁磁性颗粒用于与第二抗体结合，用做捕获HBsAg抗原蛋白的载体；所述第一抗体与所述第二抗体均能与所述HBsAg抗原蛋白进行特异性结合，且所述第一抗体不同于所述第二抗体。本发明还公开了这种组合物的使用方法，即相应的检测方法。这种组合物成本低，检测效率高，对于HBsAg抗原蛋白检测具有高灵敏度、低检测限、宽检测范围的特点，该组合物及其使用方法具有良好的应用前景，为HBsAg抗原蛋白检测提供了新的思路。

技术领域

本申请涉及物质检测领域，尤其涉及检测HBsAg抗原蛋白的组合物及 其使用方法。

背景技术

乙型肝炎病毒(HBV)属于嗜肝DNA病毒，它是引起全球性公共卫生 问题的乙型肝炎的病原体，有着极强的传染性。HBV感染者以食欲衰减、 恶心呕吐以及肝功能异常为主要临床表现，而重型HBV感染者表现为肝肾 功能衰竭，并且有着出血倾向，甚至导致死亡。为了保护人类健康，对HBV 进行早期诊断与检测是迫在眉睫的事情。乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是糖 基化的病毒蛋白gp27，大量存在于感染者的血液中，HBsAg为HBV感染 后首个出现的血清标志物，不仅效价最高，而且与HBV复制指标 HBV-DNA有着明显的正相关性，对乙型肝炎的早期诊断有着十分重要的意 义。迄今为止，对HBsAg的检测方法主要包括：酶联免疫吸附测定、金纳 米颗粒标记技术、电化学测试以及化学发光法等。但是以上方法通常不仅需 要昂贵的设备与仪器，并且存在操作复杂、实验流程耗时等弊端，因此，研 制出一种简单、高灵敏、耗时短的能够对HBsAg产生高亲和力，达到高特 异性识别的新型低浓度检测传感器体系，是十分有必要的。

发明内容

基于以上问题，本发明提出了一种用于检测HBsAg抗原蛋白的组合物， 包括钙钛矿荧光复合物与四氧化三铁磁性颗粒；

所述钙钛矿荧光复合物用于与第一抗体结合，提供荧光型号；

所述四氧化三铁磁性颗粒用于与第二抗体结合，用做捕获HBsAg抗原 蛋白的载体；

所述第一抗体与所述第二抗体均能与所述HBsAg抗原蛋白进行特异性 结合，且所述第一抗体不同于所述第二抗体。

在其中一个实施例中，所述四氧化三铁磁性颗粒的表面具有羧基官能团， 所述四氧化三铁磁性颗粒的粒径为20nm-200nm。

在其中一个实施例中，所述钙钛矿荧光复合物包括钙钛矿荧光量子点和 聚合物，所述钙钛矿荧光量子点分散于所述聚合物内部。

在其中一个实施例中，所述钙钛矿荧光复合物为微球状，所述四氧化三 铁磁性颗粒的粒径为100nm-500nm，所述钙钛矿荧光量子点为铯铅溴钙钛矿 量子点，所述聚合物为苯乙烯-丙烯酰胺共聚物。

在其中一个实施例中，所述钙钛矿荧光量子点的粒径低于15nm。

这种组合物成本低，检测效率高，对于HBsAg抗原蛋白检测具有高灵 敏度、低检测限、宽检测范围的特点，具有良好的应用前景，为HBsAg抗 原蛋白检测提供了新的思路。

本发明的另一方面，提供了上述组合物的使用方法，包括以下步骤：

S1：提供第一抗体和四氧化三铁磁性颗粒，使四氧化三铁磁性颗粒与所 述第一抗体结合，形成第一交联物；

S2：提供第二抗体和钙钛矿荧光复合物，使所述第二抗体与所述钙钛矿 荧光复合物结合，形成第二交联物；

S3：将所述第一交联物、所述第二交联物与待测物混合于缓冲液中，孵 育0.5-2h得到第一混合液；

S4：对第一混合液进行磁分离后，对得到的磁性固态物分散于缓冲液后 结合荧光光谱仪进行检测。