[发明专利]一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及其标准指纹图谱

说明书

本发明涉及一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法：根据保元汤处方制备保元汤煎液；取保元汤煎液，制成供试品溶液；精确称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸铵、6‑姜辣素对照品，配成混合对照品溶液；将供试品溶液注入高效液相色谱仪测定，得到的指纹谱图；其中高效液相色谱仪检测波长为200‑205nm和250‑260nm；流动相A：100%乙腈，流动相B：体积分数为0.05‑0.2%的磷酸水溶液。本发明提供的双波长指纹图谱方法可有效地表征保元汤五味药中的主要化学成分，为保元汤的全面质量控制提供了有效的检测方法。

技术领域

本发明属于中药检测及质量控制技术领域，具体涉及一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法及及其标准指纹图谱。

背景技术

2018年4月13日国家中医管理局公布了《古代经典名方目录(第一批)》，最早源自《博爱心鉴》(明·魏直)，由《兰室秘藏》(金·李东垣)黄芪汤衍化而来，并收录于《简明医彀》(明·孙志宏)中，原方记载：“人参(一钱)、黄芪(二钱)、甘草(五分)、肉桂(二分)、又加生姜一片”，煎煮方法：“每剂水二钟，煎八分，渣用水钟半，煎七分”。

保元汤主治功效为治元气虚弱，精神倦怠，肌肉柔慢，饮食少进，面青白，睡卧宁静，及有杂证，皆属虚弱，宜服；其药理作用主要有对免疫系统、血液系统、心血管系统作用及抗氧化作用等；现代临床主要应用于治疗冠心病、慢性肾功能衰竭、肾炎、再生障碍性贫血、慢性乙型肝炎及术后感染等。

经典名方的开发是目前中医药行业发展的研究热点，以古代医籍中记载的制作方法为主要依据，利用现代制作方法还原古方从而制成现代中药方剂；经典名方的《申报资料》中规定应研究全面反映对应实物质量信息的内容，特别是建立多味中药复方各成分的指纹图谱信息及指纹图谱方法，对经典名方质量控制及质量可传递性具有十分重要的意义。

公开号为CN 110907580 A的专利中采用HPLC仅检测了保元汤人参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1三个成分的特征图谱，公开号为CN 112903882 A的专利中用HPLC仅检测了保元汤人参、黄芪和甘草中的指纹图谱。然而中药复方保元汤中成分复杂、化合物性质差异大，每种成分的紫外吸收特征各异，单波长的指纹图谱检测方法难以全面、有效地反应复方中的多成分类型信息，由上可见，亟需一种可全面检测保元汤主要成分的双波长指纹图谱检测方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，针对现有技术中无简单快速的指纹图谱方法全面控制保元汤质量。

本发明的技术方案是，一种保元汤的双波长指纹图谱建立方法，包括以下步骤：

(1)根据保元汤处方制备保元汤煎液；

(2)取保元汤煎液，制成供试品溶液；

(3)精确称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸铵、6-姜辣素对照品，配成混合对照品溶液；

(4)将供试品溶液和混合对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，得到保元汤指纹图谱；其中高效液相色谱仪检测波长为200-205nm和250-260nm；流动相A：100％乙腈，流动相B：体积分数为0.05-0.2％的磷酸水溶液。

优选地，步骤(4)中，色谱条件为：

采用梯度洗脱：0～5min，14％～17％乙腈，86％～83％磷酸水溶液；

5～12min，17％～19％乙腈，83％～81％磷酸水溶液；

12～59min，19％～25％乙腈，81％～75％磷酸水溶液；

59～75min，25％～30％乙腈，75％～70％磷酸水溶液；

75～120min，30％～47％乙腈，70％～53％磷酸水溶液；