[发明专利]一种荧光假单胞菌的固定化装置及方法

说明书

本发明提供了一种荧光假单胞菌的固定化装置及方法，属于农业生物技术领域，所述固定化装置包括颗粒形成槽，所述颗粒形成槽的顶部设置有进料组件；所述进料组件的底部固定有多个滴头。荧光假单胞菌菌液与灭菌的海藻酸钠水溶液混合，得到混合料，混合料通过本发明的滴头后形成液滴，液滴滴入含有乳酸钙水溶液的颗粒形成槽中硬化成型，得到固化凝胶。本发明通过多个滴头的集成，能够提高荧光假单胞菌固定化微球的制备效率，相比常规的采用注射器挤压法制备，制备量能够显著提高，易于工业化普及。

技术领域

本发明涉及农业生物技术领域，尤其涉及一种荧光假单胞菌的固定化装置及方法。

背景技术

荧光假单胞菌(Pseudomonas protegens)属革兰氏阴性杆状细菌，常见于植物根围和土壤中，是一种植物根际促生细菌，具有繁殖速度快、适应能力强、易于人工培养、制剂稳定、施用方便、不污染环境、防治多种植物病害等优点。

固定化细胞是指固定在水不溶性载体上，且能在一定的空间范围进行生命活动的细胞。现有的固定化技术包括微胶囊包埋、载体吸附等方法。通过细胞的固定化可以减少外界不良环境对生物体的影响，使其尽可能保持旺盛的代谢活性，且微生物活体细胞能被重复和连续使用。细胞固定化技术在生物技术领域已经显示出巨大的应用潜力。在未来，具有制备工艺简便、稳定性强及可连续操作的细胞固定化技术将在生物发酵领域内得到更广泛应用。在已有的固定化技术中，海藻酸钠由于在细胞固定化过程中具有对生物无毒性、传质性能较好和具有良好的生物相容性等特点，已被广泛采用。

现有的荧光假单胞菌的固定化常用注射器挤压法，主要区别是固定化过程中原材料的选择略有不同。例如，中国专利CN110358709A公开了一种荧光假单胞菌微胶囊剂及其制备方法和应用，使用的材料为氧化海藻酸钠和明胶与淀粉；中国专利CN105861365A公开了一株假单胞菌LD23及其固定化微球的制备，使用的材料为海藻酸钠与活性炭。以上两种方法均为注射器挤压法，制备量较小，难以在实际生产中推广应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种荧光假单胞菌的固定化装置及方法，本发明的固定化装置和方法能够大量制备荧光假单胞菌固定化微球。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种荧光假单胞菌的固定化装置，包括颗粒形成槽1，所述颗粒形成槽1的顶部设置有进料组件2；所述进料组件2的底部固定有多个滴头。

优选的，所述固定化装置还包括收集槽3；所述收集槽3设置于所述颗粒形成槽1的下方；所述收集槽3通过管道和所述颗粒形成槽1连通。

优选的，在所述收集槽3的顶部设置有水平滑轨6；所述水平滑轨6与所述进料组件2平行设置；在所述水平滑轨6上设置有与水平滑轨6适配的水平滑轨网箱4。

本发明还提供了一种基于上述方案所述固定化装置的荧光假单胞菌的固定化方法，包括以下步骤：

将灭菌的海藻酸钠水溶液和荧光假单胞菌菌液混合，得到混合料；

将所述混合液滴加到颗粒形成槽1的乳酸钙水溶液或氯化钙水溶液中，进行固定化，得到固定化产物，对所述固定化产物进行过滤，收集固体组分，得到固定化的荧光假单胞菌。

优选的，所述荧光假单胞菌中荧光假单胞菌的有效活菌数为200亿cfu/ml～800亿cfu/ml。

优选的，所述混合料中海藻酸钠的质量百分含量为1％～1.5％。

优选的，所述乳酸钙水溶液中乳酸钙的质量百分含量为1.5％～2％；所述氯化钙水溶液中氯化钙的质量百分含量为1.5％～2％。

优选的，所述灭菌的海藻酸钠水溶液中还含有SiO₂；所述SiO₂的质量百分含量为0.05％～0.1％。