[发明专利]一种细胞膜修饰脂质体的方法

说明书

本发明公开了一种细胞膜修饰脂质体的方法，包括将脂质材料溶于有机溶剂中，待有机溶剂挥发完毕形成脂质干燥薄膜，再向上述脂质干燥薄膜中加入含细胞膜的水溶液，在氮气保护的条件下依次经过水合、分散和/或微孔挤压，得到细胞膜修饰的脂质体。与在已形成的脂质体表面修饰细胞膜方法相比，本发明一步完成脂质体的制备和细胞膜的修饰，不仅可以获得细胞膜修饰的脂质体，还可以减少在制备过程中引起的药物渗漏，用作药物载体可提高药物生物相容性、载药量以及药物的肿瘤靶向性。

技术领域

本发明属于材料和生物医学技术领域，具体涉及一种细胞膜修饰脂质体的方法。

背景技术

脂质体是由磷脂或磷脂与胆固醇按比例在水相中自发形成的双分子层囊泡，囊泡的内水相可装载水溶性药物，脂质分子的不饱和脂肪酸链之间可安插脂溶性药物，因此水溶性好和脂溶性好的药物都能很好地装载到脂质体中，所形成的脂质体载药粒子在疾病诊断和治疗领域有广泛应用。虽然脂质体的生物相容性和载药性能均很好，粒度可控，但静脉注射后，作为外来异物，相当一部分脂质体还未抵达病灶(如肿瘤)部位，就被体内免疫系统识别和清除。为了提高脂质体向病灶部位输送的效率，常在脂质体上修饰聚合物尤其是聚乙二醇(PEG)，以减少与调理素的相互作用和免疫系统的识别吞噬，延长在体内的循环时间。但是，PEG在体内稳定性有限，还有可能引起体液免疫反应，如发生抗PEG免疫响应，还会引起血液凝结和细胞凝结，且仍存在被体内网状内皮系统识别和吞噬的机会，不具备识别癌细胞的能力。

在脂质体等纳米粒子表面修饰细胞膜，所获得的载药系统在体内靶向输送方面明显优于PEG修饰。细胞膜属于天然材料，生物相容性好，细胞膜表面上的一些蛋白如CD47可免于宿主免疫系统攻击，逃避巨噬细胞吞噬，使载药粒子能“隐蔽”地在体内长循环，从而有更多机会进入病灶；而且有些细胞有“粘附”肿瘤细胞的能力，具有主动靶向肿瘤组织的能力，这种仿生纳米粒子在提高肿瘤靶向成像和靶向治疗效率方面有重要意义。

构建细胞膜修饰的纳米粒子通常分两步：首先准备好纳米粒子，然后在纳米粒子表面修饰细胞膜[Gao,et al.,Surface Functionalization of Gold Nanoparticleswith Red Blood Cell Membranes.Adv.Mater.2013,25,3549–3553]，制备过程主要是将细胞膜与纳米粒子进行混合，然后反复通过微孔进行挤压。但是，对于已经装载药物的纳米粒子，在其表面修饰细胞膜的过程会引起药物渗漏，特别是载药脂质体，由于脂质体膜的流动性，细胞膜与载药脂质体反复通过微孔挤压的过程会改变脂质体的大小和形貌，促进药物渗漏，不利于获得高载药量的载药纳米粒子。

发明内容

鉴于此，本发明的目的是提供一种细胞膜修饰脂质体的方法，一步完成脂质体的制备和细胞膜的修饰，该方法可减少制备过程中的药物渗漏。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种细胞膜修饰脂质体的方法，包括以下步骤：

(1)将脂质材料溶于有机溶剂中，待有机溶剂挥发完毕形成脂质干燥薄膜；

(2)向上述脂质干燥薄膜中加入含细胞膜的水溶液，在氮气保护的条件下依次经过水合、分散和/或微孔挤压，得到细胞膜修饰的脂质体。

优选地，所述脂质材料选自磷脂或磷脂与胆固醇的混合物，其中磷脂选自天然磷脂或人工合成的磷脂。

优选地，所述细胞膜来源于人或动物离体组织的细胞，选自红细胞膜、上皮细胞膜、白细胞膜、巨噬细胞膜、干细胞膜、血小板膜或肿瘤细胞膜中的一种或两种以上组合。

优选地，所述脂质材料和细胞膜的比例满足：当所述脂质材料为3mg时，所述细胞膜来源于1×10⁴–1×10⁷个细胞提取得到；如果脂质材料大于3mg时，细胞膜的量按上述比例增加；如果脂质材料小于3mg，细胞膜的量按上述比例减少。