[发明专利]一种用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法有效
申请号: | 202111495399.1 | 申请日: | 2021-12-09 |
公开(公告)号: | CN114414796B | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
发明(设计)人: | 欧阳云;郑水娣;方芳 | 申请(专利权)人: | 杭州莱和生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/548;G01N33/58;G01N33/533;B26D1/18 |
代理公司: | 杭州惟臻专利代理事务所(普通合伙) 33398 | 代理人: | 陈志锋 |
地址: | 310051 浙江省杭州市滨江区西兴街*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 毛发 痕量 毒品 荧光 免疫 检测 方法 | ||
本发明公开了一种用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法,该方法采用一荧光免疫试剂盒进行,所述荧光免疫试剂盒包括样品裂解液,荧光免疫层析试纸条,所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫,所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上;所述样品垫上有毒品抗体‑量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG‑量子点纳米颗粒复合物;本发明利用表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液组成的裂解液对毛发中的毒品进行溶出,表面活性剂、角蛋白酶和缓冲溶液的共同作用,能够有效提高毛发中毒品的溶出率和溶出速度。
技术领域
本发明属于生物检测技术领域,尤其是涉及一种用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法。
背景技术
随着检测手段的进步,对人体毒品残留的检测中,相较于传统血液、尿液等检测对象,毛发检测的标本容易获得,现场操作简单,避免了吸毒人员的取证不配合,标本掺假,成为了一种重要的毒品检测对象。
目前,气相色谱法、气相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、免疫分析法等多种检测方法已经被用于对毒品的检测。例如中国专利CN101750458B公开了一种检测人体中毒品残留的方法,其采用HPLC-Chip-MS/MS和HPLC-MS/MS来检测毒品残留,具有费用低,准确性和稳定性高的优点。中国专利CN104422762A公开了一种检测尿液、唾液、血液、毛发中毒品的酶联免疫试剂盒和检测方法,该酶联免疫试剂盒具有高特异性、高灵敏度等特点。
禁毒形势使得新型、有效、快速、准确、稳定的检测方法和装置的需求进一步被放大。
发明内容
本发明为了克服现有技术的不足,提供一种用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法。
为了实现上述目的,本发明采用以下技术方案:一种用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法,该方法采用一荧光免疫试剂盒进行,所述荧光免疫试剂盒包括样品裂解液,荧光免疫层析试纸条,所述荧光免疫层析试纸条包含PVC衬板、硝酸纤维膜、样品垫和吸收垫,所述样品垫、硝酸纤维膜和吸收垫依次交错固定于PVC衬板之上;所述样品垫上有毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物;所述荧光免疫层析试纸条的生产步骤为:
a、将毒品抗原-牛血清白蛋白复合物和羊抗兔抗体用点膜机分别点于硝酸纤维素膜的测试区和质控区上,充分干燥,使硝酸纤维素膜牢固地吸附原料;
b、将毒品抗体-量子点纳米颗粒复合物以及兔IgG-量子点纳米颗粒复合物溶液混匀后处理在样本垫上,充分干燥;
c、将上述硝酸纤维素膜复合在PVC塑料薄板上;
d、将复合好的塑料薄板置于切割机上,第一推板推动塑料薄板往连接腔方向移动,塑料薄板一侧置于连接腔顶部,第一切刀移动切割塑料薄板,切断后的塑料薄板掉落在连接腔底部的加工腔内,加工腔内的塑料薄板往前移动至第二切刀一侧,第二切刀移动从另一方向切割塑料薄板,将塑料薄板切割成单人份;
e、将单人份试纸装入配套使用的塑料盒内;
f、将塑料盒、干燥剂、滴管放入包装袋内,封口、待检;
g、待检品抽检其灵敏度、特异性和稳定性合格出厂;
所述用于毛发痕量毒品的荧光免疫检测方法具体为:选择离头皮0.5厘米内的毛发,取毛发5mg用剪刀剪成长度为1-2mm,用剪刀剪成1-2mm小段于对折的取样纸上;将剪碎的毛发倒入装有毛发裂解液的瓶子内,盖紧瓶盖,震荡混匀1分钟。用滴管吸取毛发裂解液的上清,滴加2滴在试剂板的加样孔中;荧光检测分析仪检测试纸条荧光信号,并将荧光信号转化为电信号,然后通过每批次试纸条ID卡上的标准曲线信息自动计算浓度,并呈现在仪器的显示屏上。
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