[发明专利]一种鉴别青海产富硒黑蒜的方法

权利要求书

1.一种鉴别青海产富硒黑蒜的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对已知产地的黑蒜样品分别进行提取，得到黑蒜提取物；所述已知产地的黑蒜样品包括青海产富硒黑蒜和其他已知产地黑蒜样品；所述提取用试剂为甲醇水溶液；

(2)分别获取所述步骤(1)中黑蒜提取物的核磁共振氢谱，对所述核磁共振氢谱进行归一化处理，得到核磁全谱数据；

(3)将所述步骤(2)中的核磁全谱数据导入SMICA软件中，以所述核磁全谱数据作为X值，以产地作为Y值，采用正交偏最小二乘法进行有监督的聚类分析，得到OPLS-DA模型；

(4)采用所述步骤(1)～(2)的方法获取待确定产地的黑蒜样品的核磁全谱数据；将所述待确定产地的黑蒜样品的核磁全谱数据导入步骤(3)所述OPLS-DA模型中进行预测，得到预测得分值；若所述预测得分值大于0.5，则判定所述待确定产地的黑蒜样品为青海产富硒黑蒜；若所述预测得分值小于0.5，则判定所述待确定产地的黑蒜样品为其他产地黑蒜。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中其他已知产地黑蒜样品包括广东河源、河北衡水、江苏徐州、山东金乡和云南大理黑蒜样品中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中提取的方法包括以下步骤：

将所述已知产地的黑蒜样品分别去皮后进行碾压，得到泥状样品；

将所述泥状样品与甲醇水溶液和磷酸盐缓冲液混合，将所得混合液依次进行涡旋振荡、超声和离心，取上清液浓缩至干，得到所述黑蒜提取物。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述甲醇水溶液的体积分数为20～90％；所述泥状样品与甲醇水溶液的用量比为0.1g:1～5mL。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的pH值为2～8，浓度为0.05～3mol/L；所述泥状样品与磷酸盐缓冲液的用量比为0.1g：20～100μL。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述涡旋振荡的时间为3～10min；所述超声的时间为30～60min；所述离心的速度为10000～12000rpm，时间为10～20min；所述浓缩至干的方法为旋转蒸发，所述旋转蒸发的温度为45～50℃，时间为3～5h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中获取黑蒜提取物的核磁共振氢谱的方法包括以下步骤：

将所述黑蒜提取物与氘代试剂混合，将所得混合液依次进行涡旋振荡、超声和离心，得到上清液；所述氘代试剂中加入四甲基硅烷作为内标物；

取所述上清液进行核磁共振检测，得到所述核磁共振氢谱。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述氘代试剂为氘代甲醇或重水；所述黑蒜提取物与氘代试剂的用量比为0.1g:0.6～1.0mL。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述涡旋震荡的时间为3～10min；所述超声的时间为10～20min；所述离心的速度为10000～12000rpm，时间为10～20min。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述核磁共振检测的条件为：5mm多核宽带观测探头，观测频率为600.13MHz，采用标准ZG30脉冲序列采集；参数设置为：图谱宽度SW为19.8ppm，图谱的中心点O1P为6.175ppm，谱图分辨率FIDRES为0.363Hz，扫描次数NS为16。