[发明专利]一种C反应蛋白检测试剂处理液、试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及一种C反应蛋白检测试剂处理液、试剂盒及检测方法，其中处理液包括以下组分:柠檬酸、柠檬酸三钠、Tween‑20，该处理液的pH值为3.3～3.6。通过对处理液的pH值的设定，可以降低C反应蛋白检测时整体反应体系的pH，缩短孵育时间，使得整体反应时间相对同类产品较短，结果产出快；另外还能控制反应速率，提高低端灵敏度的准确性，扩大检测的线性范围，解决HOOK效应。

技术领域

本发明涉及化学发光检测技术领域，具体涉及一种C反应蛋白检测试剂处理液、试剂盒及检测方法。

背景技术

C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)包括常规C反应蛋白和超敏C反应蛋白，是一种急性时相反应蛋白，在胎儿时期产生，非母体胎盘传递，健康人血清浓度低。其产生机理是:当机体受感染或组织受损伤时巨噬细胞和其他白细胞等被激活，产生白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1)等细胞因子及其他介导物，这些细胞因子和介导物到达肝脏，刺激肝细胞和上皮细胞合成CRP，可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清楚入侵机体的病原微生物和损伤、坏死、凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。在结构上，人类的CRP由5个相同的非糖基化多肽亚基组成，每个亚基包含206个氨基酸残基和两个钙离子结合位点，具有很好的稳定性及精确性，是炎症和组织损伤的非特异性标志物。

在健康人体中，血清CRP含量一般低于5mg/L，在细菌感染时显著升高，早期细菌和严重病毒感染轻度升高，一般病毒感染不升高。在炎症、组织损伤和手术后，CRP浓度显著增高；疾病后4-6h开始升高，6-12h就可以检测到血液中升高的CRP，24-48h达到高峰，比正常值高100-1000倍，升高幅度与感染程度呈正相关，持续时间与病程相当。因此通过不同浓度的CRP不仅可以鉴别细菌感染和病毒感染，还能反应机体炎症的严重程度等，是一项灵敏度高、特异性强的指标，已被公认为是目前最敏感的脓毒血症诊断指标，其对感染前期的诊断、鉴别感染类型和感染程度，指导抗生素应用等方面有很高的价值，因此，检测血清CRP浓度在临床上有很高的指导意义。

C反应蛋白一般是通过化学发光检测法进行检测，但检测反应时间长，结果产出慢，并且检测线性范围比较窄，对于低浓度的C反应蛋白检测敏感度不高，影响检测效果，因此如何提高C反应蛋白试剂盒低端灵敏度，以及如如何扩大检测线性范围成为C反应蛋白检测技术的研究方向。

发明内容

本发明的目的是提供一种C反应蛋白检测试剂处理液、试剂盒及检测方法，以解决现有技术检测C反应蛋白的时间长，结果产出慢，并且检测线性范围较窄的问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:一种C反应蛋白检测试剂处理液，处理液包括以下组分:柠檬酸、柠檬酸三钠、Tween-20，该处理液的pH值为3.3～3.6。

进一步优选，所述处理液中，柠檬酸、柠檬酸三钠、Tween-20的配制质量比为4.5～5.5:2.5～3.5:1。

一种试剂盒，包括权利要求1所述的C反应蛋白检测试剂处理液，还包括 R1试剂和R2试剂；

所述R1试剂为被Tris缓冲液稀释的偶联磁珠，所述偶联磁珠包被着C反应蛋白抗体；

所述R2试剂为被MES缓冲液稀释的标记抗体。

进一步优选，所述处理液中，柠檬酸、柠檬酸三钠、Tween-20的添加量的比例为4.5～5.5:2.5～3.5:1。

进一步优选，所述标记抗体包括C反应蛋白抗体和吖啶酮类化合物。

进一步优选，所述吖啶酮类化合物为吖啶酯。

一种检测方法，包括上述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒用于检测C 反应蛋白样本中C反应蛋白的浓度，所述C反应蛋白血清样本、处理液、R1试剂和R2试剂参与化学发光检验的测试体积比为1：8～12:5:10。