[发明专利]一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法

权利要求书

1.一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)ZEN毒素偶氮反应：将不同浓度ZEN标准样品与偶氮反应试剂及偶氮反应辅助试剂混合，经冰浴反应得到偶氮反应产物；

(2)收集标准SERS谱图：将偶氮反应产物与等体积的Ag溶胶混合均匀后用便携式拉曼光谱仪进行SERS检测，得到SERS谱图；

(3)拟合标准曲线：将SERS谱图中特征峰的面积和ZEN标准品浓度的对数作图，并进行拟合得到标准曲线；

(4)提取ZEN毒素：将待测样品分别用水分散浸泡，加入萃取剂，然后加入缓冲盐及净化剂，离心过滤得到含ZEN萃取液；

(5)SERS定量检测：将上述得到的含ZEN萃取液按照步骤(1)进行偶氮反应得到反应产物，然后加入等体积的Ag溶胶混合均匀，用拉曼光谱仪进行SERS检测；如果SERS谱图中出现偶氮产物的特征峰，则表明所检测的样品中含有ZEN毒素，并根据步骤(3)得到的标准曲线定量测得样品中ZEN的浓度。

2.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(1)中含ZEN萃取液、偶氮反应试剂和偶氮反应辅助试剂的体积比为4-6:1-3:1-3。

3.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(1)中偶氮反应试剂的浓度为1.0×10^-3-1.0×10^-7M，为偶氮试剂溶于1.0M的盐酸溶液中配制成，所述偶氮试剂为对氨基苯丙酸、对巯基苯胺、对苯二胺、对氨基苯硫酚、对甲基苯胺中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(1)中偶氮反应辅助试剂为硝酸钠水溶液和碳酸钠水溶液按照体积比为1-3:1-3混合而成，所述硝酸钠水溶液质量分数为0.1％-1.0％，所述碳酸钠水溶液质量分数为1.0％-15％。

5.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(2)和(5)中Ag溶胶采用柠檬酸钠还原法制得。

6.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中的萃取剂为三氯甲烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、正己烷、正丁醇、环己烷、甲醇、乙腈和丙酮中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中的缓冲盐及净化剂为MgSO₄、NaCl、柠檬酸钠、柠檬酸二钠、PSA、C₁₈的混合物，MgSO₄、NaCl、柠檬酸钠、柠檬酸二钠、PSA、C₁₈的质量比为8-10:2-6:1-2:1-2:1-3:1-2。

8.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中待测样品、萃取剂、缓冲盐及净化剂的比例为1-5g:2-10ml:1-5g。

9.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(4)中加入萃取剂后漩涡混匀0.5-2min，加入缓冲盐及净化剂后继续涡旋1-5min，在4000-6000r/min转速下离心。

10.根据权利要求1所述的一种基于SERS快速准确检测粮食中玉米赤霉烯酮毒素的方法，其特征在于，所述步骤(5)中拉曼光谱仪为便携式拉曼光谱仪，激光波长为785nm，功率为500mw。