[发明专利]一种反相高效液相色谱检测阿福拉纳中间体的方法

说明书

本发明公开了一种反相高效液相色谱检测阿福拉纳中间体的方法，所述阿福拉纳中间体为4‑肟甲基‑1‑萘甲酸。该方法包括以下步骤：1)配制供试品溶液；2)使用反相高效液相色谱测定供试品溶液；3)利用面积归一化法确定供试品溶液中阿福拉纳中间体的含量。通过简单的流动相组分，就能实现供试品溶液中各色谱峰之间的完全分离，该方法检测结果精密度高、重复性好且稳定，能准确控制阿福拉纳中间体的纯度。

技术领域

本发明属于药物分析化学技术领域，具体涉及一种反相高效液相色谱检测阿福拉纳中间体的方法。

背景技术

异噁唑啉类杀虫剂阿福拉纳作为新一代犬用口服体外驱虫药，因其药效迅速、口服方便且美味适口而闻名。实验证明，因该药物杀灭虫蚤迅速，且能够持续抑制虫蚤产卵；驱杀蝉虫种类多，且药效通常持续4周以上，并广泛应用于环境治理方面。

阿福拉纳中间体化学名称为4-肟甲基-1-萘甲酸，是阿福拉纳原料药的一个关键中间体，其结构式如下所示：

目前有关4-肟甲基-1-萘甲酸的质量评价方法并无相关报道，为保证其作为中间体合成的阿福拉纳原料药的质量，进而确保用药安全，需要发明一种高效的检测方法确定阿福拉纳中间体的纯度。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种反相高效液相色谱检测阿福拉纳中间体的方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种反相高效液相色谱检测阿福拉纳中间体的方法，包括如下步骤：

配制阿福拉纳中间体供试品溶液；

使用反相高效液相色谱测定供试品溶液的色谱图，所述反相高效液相色谱的流动相A为乙腈，流动相B为三氟乙酸水溶液，洗脱程序为梯度洗脱；

依据供试品溶液的色谱图，利用面积归一化法确定供试品溶液中阿福拉纳中间体的含量。

在一些实例中，所述流动相B为体积分数0.01％～0.02％三氟乙酸的水溶液。

在一些实例中，梯度洗脱时间及流动相乙腈的体积比顺序为：以体积分数计，0min～9min，40％～55％运行；9min～15min，55％～65％运行；15.1min～25min，40％运行。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的流速为1.0mL/min～1.2mL/min。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的柱温为25℃～40℃。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的进样量为5μL～15μL。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的紫外检测波长为240nm～250nm。

在一些实例中，所述供试品溶液采用体积分数为30％～60％的乙腈水溶液进行配制。

在一些实例中，所述供试品溶液的质量浓度为0.2mg/mL～0.8mg/mL。

在一些实例中，包括如下步骤：

采用体积分数为30％～60％的乙腈水溶液配制阿福拉纳中间体供试品溶液，其质量浓度为0.2mg/mL～0.8mg/mL。

使用反相高效液相色谱测定供试品溶液的色谱图，所述反相高效液相色谱的流动相A为乙腈，流动相B为体积分数0.01％～0.02％三氟乙酸的水溶液，梯度洗脱时间及流动相乙腈的体积比顺序为：0min～9min，40％～55％运行；9min～15min，55％～65％运行；15.1min～25min，40％运行。流速为1.0mL/min～1.2mL/min，柱温为25℃～40℃，进样量为5μL～15μL，检测波长为240nm～250nm。