[发明专利]东俄洛紫菀或缘毛紫菀的检测方法

说明书

本发明提供了一种采用UPLC对东俄洛紫菀或缘毛紫菀的检测方法。本发明在UPLC中采用特定的色谱条件，可以在东俄洛紫菀或缘毛紫菀中有效分离检测出12个以上的色谱峰，并可以对其中12个色谱峰进行定性和定量检测，为东俄洛紫菀或缘毛紫菀的质量控制提供了有效的方法。

技术领域

本发明涉及对天然植物药物的分析方法。

背景技术

藏紫菀主要以菊科紫菀属的多种植物入药，来源丰富，为典型的多基原藏药材，李彪等研究发现仅青藏甘南地区就分布有菊科药用植物 28 属 70 余种，具有较高的挖掘研究潜力，黎维平等通过对菊科紫菀属植物进行生物学研究后，得出对青藏高原的紫苑属类群开展研究的必要性。紫菀属植物是分类学上公认的“困难类群”，其作为藏紫菀的主要来源也面临着基原混乱的问题，不利于藏紫菀药材总体质量的控制和评价，临床用药的安全和有效得不到保障。

发明内容

基于目前藏紫菀用药的混乱，本发明拟提供一种关于藏紫菀中各品种的检测方法。本发明中主要涉及东俄洛紫菀或缘毛紫菀的检测。

缘毛紫菀（拉丁学名：Aster souliei Franch.）为菊科紫菀属多年生草本植物。根状茎粗壮，木质。茎单生或与莲座状叶丛丛生，直立，高5-45厘米。头状花序在茎端单生，瘦果卵圆形，稍扁，基部稍狭。产于四川、甘肃、云南、西藏。生于高山针林外缘、灌丛及山坡草地。海拔2700-4000米。

东俄洛紫菀（Aster tongolensis Franch.），是菊科紫菀属的植物，是中国的特有植物。主要分布于我国甘肃、四川、云南、青海的一种观赏类菊花，以其清雅的花色和典致的色泽而闻名。该种为多年生草本，头状花序，舌片蓝色或浅红色，瘦果倒卵圆形。除此之外东俄洛紫菀还有温肺下气，祛痰止咳和利尿的药理作用，所以也可以作为药物使用。

95版藏药标准中，藏紫菀仅收载了缘毛紫菀。而本次藏药标准起草中，将东俄洛紫菀也收载其中。但两者是否存在差异，如何对两种药材进行区分，仍然是一个问题。

基于上述问题，本发明提供了东俄洛紫菀或缘毛紫菀的检测方法，包括如下内容：

（1）取待检药材，60~80%乙醇提取，醇提物上大孔树脂，依次用10-20%、60-80%乙醇洗脱，收集60-80%乙醇洗脱液，浓缩干燥得到粗提物；

（2）将粗提物采用UPLC进行检测，色谱条件如下：

色谱柱：C18

流动相：乙腈（A）-0.01~0.5% 甲酸水溶液（B）；梯度洗脱程序为，0～5 min，10%～12% A；5～19 min，12%～16% A；19～26 min，16%～24% A；26～28 min，24%～24% A；28～30min，24%～ 30%A；35～45 min，30%～45% A。

本发明中某些实施方式中，色谱柱尺寸为：2.1×100 mm，1.8 µm。

流动相流速、柱温、进样量等可以按照UPLC的相关规定进行调整。

本发明某些实施方式中，流动相流速为0.2 mL·min^-1。

本发明某些实施方式中，柱温 35±2℃。

UPLC检测，可以采用190-400nm波长进行扫描，根据色谱图出峰情况进行选择。本发明某些实施方式中，检测波长325 ±5nm。

本发明对药材进行提取时，提取时使用的乙醇可以选择60%、65%、70%、75%、或80%乙醇等浓度。大孔树脂洗脱时，10-20%的乙醇可以选择10%、15%、20%等浓度。60-80%乙醇可以选择60%、65%、70%、75%、80%等浓度。

本发明使用的大孔树脂，主要使用非极性大孔树脂或者弱极性大孔树脂。例如使用二乙烯苯为骨架结构的树脂。