[发明专利]一种体外分析检测用细胞保存液及其制备方法

说明书

本申请涉及生物保存液技术领域，具体涉及一种体外分析检测用细胞保存液及其制备方法。所述细胞保存液包括如下浓度范围的组分：细胞固定剂60‑75v/v%、渗透压调节剂0.6‑0.9g/100mL、抗凝剂0.2‑0.5g/100mL、壳聚糖季铵盐0.3‑0.6g/100mL、海藻糖0.05‑0.2g/100mL；溶剂为超纯水，pH为7.0‑7.6。其将少量的海藻糖与壳聚糖季铵盐合用，可有效增强保护作用，有效减少细胞发生自溶腐败，提高细胞保存的完整性。该细胞保存液在制备时，使用超纯水先将细胞固化剂以外的组分溶解，能有效提高组分的溶解效果，获得均一稳定的细胞保存液，便于细胞保存液的批量生产。

技术领域

本申请涉及生物保存液技术领域，具体涉及一种体外分析检测用细胞保存液及其制备方法。

背景技术

对于如口腔、鼻咽、肛门等非血液途径获取的细胞，如何维持细胞活性是一项极大的挑战，在短时间内保存细胞并在临床上应用时，往往使用生理盐水来维持细胞活性，然而细胞在生理盐水中活性降低的速度较快，10小时之内细胞的活性丧失率可达30%甚至更高，然而许多对细胞的观察测试从取样到应用可能需要超过10小时、24小时，甚至多达数天，生理盐水无法满足需求。

为了解决这一问题，各类细胞保存液应运而生。细胞保存液是一种能够帮助细胞保持原有形态、结构的一种化学药品，其功能是减小细胞死亡后的变化，阻止其自溶腐败，尽量保持生长状态结构，同时使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其生前的形态。

目前市场上有许多不同种类的细胞保存液，不同的厂商拥有自己的保存液配方。然而，市面上的细胞保存液在保存细胞过程中，细胞仍会发生一定的自溶腐败，使得细胞保存的完整性较差。

发明内容

为了减少细胞在保存过程中发生自溶腐败，本申请提供一种体外分析检测用细胞保存液及其制备方法。

第一方面，本申请提供一种体外分析检测用细胞保存液，采用如下的技术方案：

一种体外分析检测用细胞保存液，包括如下浓度范围的组分：细胞固定剂60-75v/v%、渗透压调节剂0.6-0.9g/100mL、抗凝剂0.2-0.5g/100mL、壳聚糖季铵盐0.3-0.6g/100mL、海藻糖0.05-0.2g/100mL；溶剂为超纯水，pH为7.0-7.6。

通过采用上述技术方案，本申请中细胞固定剂能固定细胞、病毒等结构，保存细胞、病毒等结构的形态并避免细胞内蛋白酶的裂解作用及核酸消化酶对核酸的消化作用，保存蛋白及核酸完整性以便后续分析；渗透压调节剂可用于调节细胞保存液的渗透压，能最大限度地保持细胞的形态完整，使之充分悬浮剂分散；抗凝剂用于螯合溶液中引入的重金属离子，防止细胞凝聚；壳聚糖季铵盐能固定细胞，具有良好的抗菌性；海藻糖是一种非还原性双糖，具有非常稳定的理化作用，对细胞无任何毒副作用，能够有效稳定细胞膜和蛋白质结构。

其中，本申请将少量的海藻糖与壳聚糖季铵盐合用，可有效增强保护作用，即便不额外添加防腐剂、灭菌剂等助剂，亦具有良好的杀菌效果，能快速灭活病毒或其他病原体以阻止其影响细胞活性；此外因海藻糖能在高渗透压等恶劣环境下在细胞表面形成独特的保护膜，有效保护细胞结构不被破坏，进而能有效减少细胞发生自溶腐败，有助于提高细胞保存的完整性。

优选的，所述壳聚糖季铵盐与所述海藻糖的重量浓度比为3:1。

通过采用上述技术方案，当壳聚糖季铵盐与海藻糖的重量浓度比为3:1时，其配制的细胞保存液对细胞的保存效果明显优于其他配比，因此将其作为进一步优选。

优选的，所述细胞固定剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇中的一种或多种的混合物。

优选的，所述细胞固定剂为乙醇。