[发明专利]一种琼胶酶冻干保护剂及琼胶酶的保存方法在审
申请号: | 202111320964.0 | 申请日: | 2021-11-09 |
公开(公告)号: | CN113817710A | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
发明(设计)人: | 侯艳平;何雄飞;产竹华;易志伟;张春毅;王斐 | 申请(专利权)人: | 蓝脑科技(厦门)有限公司 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N9/38;C12N9/96 |
代理公司: | 厦门荔信律和知识产权代理有限公司 35282 | 代理人: | 赖秀华 |
地址: | 361000 福建省厦门市火炬高新区(*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 琼胶酶冻干 保护 琼胶酶 保存 方法 | ||
1.一种琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述琼胶酶冻干保护剂含有琼胶寡糖1~10w/v%、缓冲溶液0.1~0.5mol/L、非还原性二糖1~5w/v%、可溶性淀粉1~10w/v%、糊精1~10w/v%、甘油5~20w/v%、甘露醇0.5~5w/v%且余量为水。
2.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述琼胶寡糖的聚合度为2~10。
3.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述琼胶寡糖选自新琼二糖、新琼四糖、新琼六糖和新琼八糖中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述琼胶寡糖按照以下方法制得:将琼胶水溶液在β-琼胶酶的存在下进行酶解,所述β-琼胶酶的基因序列为SEQ IDNO:1,之后将所得酶解产物进行纯化和浓缩;
优选地,所述酶解的条件包括温度为40~50℃,时间为3~8h;
优选地,以琼胶水溶液的总重量为100g计,所述β-琼胶酶的用量为0.1~1mL。
5.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述缓冲溶液为Tris-HCl缓冲溶液,所述Tris-HCl缓冲溶液的pH值为8.5~9.5。
6.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述非还原性二糖为海藻糖和/或蔗糖。
7.根据权利要求1所述的琼胶酶冻干保护剂,其特征在于,所述糊精选自白糊精、黄糊精、麦芽糊精和环糊精中的至少一种。
8.一种琼胶酶的保存方法,其特征在于,该方法包括往琼胶酶溶液中加入权利要求1~7中任意一项所述的琼胶酶冻干保护剂混合均匀得到琼胶酶保护液,之后将该琼胶酶保护液进行冷冻干燥。
9.根据权利要求8所述的保存方法,其特征在于,所述琼胶酶冻干保护剂与琼胶酶溶液的体积比为1:(5~15)。
10.根据权利要求8所述的保存方法,其特征在于,所述冷冻干燥的方法包括将琼胶酶保护液于-45℃~-35℃下冻结1~5h,再置于真空冷冻干燥机中并于-10℃~0℃下干燥5~10h,之后以5~10℃/min的速率逐步升温至25℃~35℃并保持2~5h完成冷冻干燥。
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