[发明专利]一种用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂由铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)菌剂、双歧杆菌属(Bifidobacterium)菌剂、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌剂和盐脱氮枝芽胞杆菌(Virgibacillus halodenitrificans)菌剂按体积比为(1-4):(1-4):(1-4):(1-4)混合而成。

2.一种如权利要求1所述的用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)固体斜面培养：将铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，恒温培养，使菌株充分活化；

2)一级种子培养：将步骤1)中活化的铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，恒温培养，当OD₆₀₀值达到0.8时停止培养，分别获得铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌的一级种子液；

3)二级种子培养：将步骤2)所得的铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌的一级种子液分别接种于发酵培养基中，于37℃，130r/min下培养2d，分别获得铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌的二级种子液；

4)将步骤3)获得的铜绿假单胞菌、双歧杆菌属、枯草芽孢杆菌和盐脱氮枝芽胞杆菌的二级种子液分别以发酵培养基1％体积比的接种量接种于发酵培养基中，于37℃，130r/min进行发酵培养1d，分别获得铜绿假单胞菌菌剂、双歧杆菌属菌剂、枯草芽孢杆菌菌剂和盐脱氮枝芽胞杆菌菌剂；

5)将铜绿假单胞菌菌剂、双歧杆菌属菌剂、枯草芽孢杆菌菌剂和盐脱氮枝芽胞杆菌菌剂按体积比为(1-4):(1-4):(1-4):(1-4)混合，得到用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂。

3.如权利要求2所述的用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤3)和步骤4)中的发酵培养基，以质量百分比计，包括：0.3％-0.5％的氯化铵，0.3％-0.5％的磷酸二氢钾，0.1％-0.3％的磷酸氢二钾，0.001％-0.02％的无水氯化钙，0.3％-1％的氯化钠，0.01％-0.02％的七水硫酸镁，1％-1.5％的糖蜜，余量为水，pH值为7.0-7.5。

4.权利要求1所述的用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂在降解石油类物质中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，采用所述用于降解含油污泥中油类污染物的复合微生物菌剂处理含油污泥时，其投加量为油泥降解液体积的10％。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述油泥降解液包括质量分数为2％的含油污泥和质量分数为98％的降解培养基，所述降解培养基，以质量百分比计，包括：0.3％-0.5％的氯化铵，0.3％-0.5％的磷酸二氢钾，0.1％-0.3％的磷酸氢二钾，0.001％-0.02％的无水氯化钙，0.3％-1％的氯化钠，0.01％-0.02％的七水硫酸镁，余量为水，且该降解培养基的pH值为7.0-7.5。