[发明专利]一种脑脊液宏基因组的提取方法在审
申请号: | 202111297319.1 | 申请日: | 2021-11-04 |
公开(公告)号: | CN113930420A | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
发明(设计)人: | 刘涛;王文;李文霞 | 申请(专利权)人: | 武汉承启医学科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脑脊液 宏基 提取 方法 | ||
本发明公开了一种脑脊液宏基因组的提取方法,本发明涉及脑脊液技术领域,脑脊液宏基因组的提取方法,包括以下步骤:a样本液化:将脑脊液样本进行降温液化;b破碎细胞:将液化后的样本进行细胞破碎;c杂质去除:对破碎细胞后的样本进行杂质去除;dDNA提取:将去除杂质后的样本,进行DNA吸附和洗脱;本发明的有益效果在于:有利于提高基因组DNA的纯度,并且整个提取过程简单方便,有效提高DNA提取的产量和效率,能更好的满足PCR、DNA文库构建、基因测序等各种分子生物学实验。
技术领域
本发明涉及脑脊液技术领域,尤其是涉及一种脑脊液宏基因组的提取方法。
背景技术
脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔的一种无色透明的液体,现有的脑脊液宏基因组的提取方法不仅提取步骤繁琐,并且提取出来的DNA容易受污染,导致DNA不纯,进而影响后续的使用,同时降低提取效果。
发明内容
本发明旨在克服上述现有技术的至少一种缺陷,提供一种脑脊液宏基因组的提取方法,所述快捷提取方法包括以下步骤:
a样本液化:将脑脊液样本进行降温液化;
b破碎细胞:将液化后的样本进行细胞破碎;
c杂质去除:对破碎细胞后的样本进行杂质去除;
dDNA提取:将去除杂质后的样本,进行DNA吸附和洗脱。
更佳的,所述步骤a中的降温温度为﹣50℃。
更佳的,所述步骤a中的液化时间为10min。
更佳的,所述步骤b中破碎细胞的目的为将DNA进行游离。
更佳的,所述步骤d中采取DNA洗脱液进行洗脱,DNA洗脱液与DNA的比例为1:1。
采用上述技术方案,所取得的有益效果是:
本发明提供一种安全、简便、污染少、重复性好的脑脊液宏基因组DNA提取方法,将抽取的脑脊液样本进行降温液化处理,其液化的降温温度为﹣50℃,并且液化时间为10min,液化完成后的样本转变为液态,将液化后的样本进行细胞破碎,破碎细胞的目的为将DNA进行游离,接着,立刻对破碎细胞后的样本进行杂质去除,这里作为对样本杂质处理的第一步,有效减少DNA中参杂的杂质;在将去除杂质后的样本,进行DNA吸附和洗脱,先将样本中的DNA吸附出来,随后再将DNA洗脱液与DNA以1:1的比例进行调试和洗脱,这里能够实现第二步对DNA的杂质和污染物处理,有利于提高基因组DNA的纯度,并且整个提取过程简单方便,有效提高DNA提取的产量和效率,能更好的满足PCR、DNA文库构建、基因测序等各种分子生物学实验。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合具体实施方式,对本发明进行进一步的详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明,并不限定本发明的保护范围。
本申请是一种脑脊液宏基因组的提取方法,所述快捷提取方法包括以下步骤:
a样本液化:首先,将抽取的脑脊液样本进行降温液化处理,其液化的降温温度为﹣50℃,并且液化时间为10min,液化完成后的样本转变为液态,并为后续提取DNA做准备;
b破碎细胞:随后,将液化后的样本进行细胞破碎,破碎细胞的目的为将DNA进行游离,提高更佳利于后期杂质的去除;
c杂质去除:接着,立刻对破碎细胞后的样本进行杂质去除,这里作为对样本杂质处理的第一步,有效减少DNA中参杂的杂质;
dDNA提取:最后,在将去除杂质后的样本,进行DNA吸附和洗脱,先将样本中的DNA吸附出来,随后再将DNA洗脱液与DNA以1:1的比例进行调试和洗脱,这里能够实现第二步对DNA的杂质和污染物处理,有利于提高基因组DNA的纯度,并且整个提取过程简单方便,有效提高DNA提取的产量和效率,能更好的满足PCR、DNA文库构建、基因测序等各种分子生物学实验。
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