[发明专利]一种野尻霉素的纯化方法有效
| 申请号： | 202111288086.9 | 申请日： | 2021-11-02 |
| 公开（公告）号： | CN113929615B | 公开（公告）日： | 2023-06-20 |
| 发明（设计）人： | 张敏;郑玲辉;石磊;彭湘屏;高祥;朱进伟;陈世敏;汪超 | 申请（专利权）人： | 浙江珲达生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07D211/46 | 分类号： | C07D211/46 |
| 代理公司： | 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人： | 张丹 |
| 地址： | 310011 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 霉素 纯化 方法 | ||
1.一种纯化1-脱氧野尻霉素的方法，其特征在于包括以下步骤：
(1) 将1-脱氧野尻霉素发酵液固液分离，酸化后加入助滤剂，过滤收集滤液；
(2) 滤液加入脱色剂进行脱色，过滤收集滤液；
(3) 将步骤(2)所得滤液进行阴离子树脂层析，阴离子树脂为LX-67，滤液与阴离子树脂体积比为1:9~1:4，使用纯水洗脱，收集洗脱液；
(4) 将步骤(3)所得洗脱液进行阳离子树脂层析，阳离子树脂为LX-712，使用氨水洗脱，氨水的洗脱浓度为0.2～0.5mol/L，洗脱速度为1～2BV/h，收集pH9~12的洗脱液；
(5) 将步骤(4)所得洗脱液酸化至中性，减压蒸干，甲醇溶解得到结晶前液，低温搅拌结晶，过滤后固相真空干燥即可得1-脱氧野尻霉素；
其中，步骤(1)中1-脱氧野尻霉素发酵液为产生1-脱氧野尻霉素的解淀粉芽孢杆菌发酵液，产生1-脱氧野尻霉素的解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌HDCC00252。
2.如权利要求1中所述的纯化方法，其特征在于：步骤(1)中酸化液相使用盐酸，调节pH至3.0～4.0。
3.如权利要求1中所述的纯化方法，其特征在于：步骤(1)中所述的助滤剂选自硅胶、中性氧化铝、纤维素和硅藻土。
4.如权利要求1中所述的纯化方法，其特征在于：步骤(2)中所述的脱色剂为活性炭，与滤液的质量体积比为1%~2%，过滤使用0.22μm的水系膜。
5.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤(4)中所述洗脱液与阳离子树脂体积比为1:8~1:1。
6.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤(5)中所述洗脱液酸化使用盐酸，调节pH至6.5～7.5，低温搅拌结晶为2~8℃下搅拌结晶12~18h。
7.如权利要求6所述的纯化方法，其特征在于：步骤(5)中所述甲醇溶解得到的结晶前液浓度为20g/L~32g/L。
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