[发明专利]一种富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法在审
申请号: | 202111280148.1 | 申请日: | 2022-03-17 |
公开(公告)号: | CN114395529A | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
发明(设计)人: | 黄兵;殷勤伟 | 申请(专利权)人: | 北京智能宝生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/095 | 分类号: | C12N5/095 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100107 北京市朝阳区天朗*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 富集 分化 扩增 悬浮 肿瘤 干细胞 方法 | ||
1.一种富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法,其特征在于,其方法步骤如下:
(1)在血液肿瘤细胞的胚胎干细胞培养基中加入Delta-like4、Jagged1和FGF2成分因子作为培养基主要组分;
(2)向所述胚胎干细胞培养基中加入抑制GSK信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂,进行半固体培养,血液肿瘤干细胞形成集落;
(3)所述胚胎干细胞培养基的组成原料按体积比包括30-100%的DMEM基础培养基、0-70%的胚胎干细胞培养基HEScGRO、0-2μg/ml的DII4、0-1μg/ml的FGF2、0-2μg/ml的Jag1、0-1μg/ml的SCF、0-1μg/ml的LIF、0-1μg/ml的TGF-β、0-1μg/ml的TPO、0-300nM的CHIR99021、0-1μM的PD173074、0-1μM的PD184352和0-1μM的PD0325901。
2.根据权利要求1所述的富集和无分化扩增悬浮肿瘤干细胞的方法,其特征在于,所述抑制GSK信号通路抑制剂和酪氨酸激酶抑制剂为CHIR99021、PD173074、PD184352或PD0325901。
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