[发明专利]一种低成本繁育斑兰组培苗的方法

权利要求书

1.一种低成本繁育斑兰组培苗的方法，其特征在于，包括如下 步骤：

S1:外植体采集：挑选生长健壮、无病虫害的母株，采集新萌发 的斑兰嫩茎顶端 2-5cm，剪去叶片，只保留贴着芽点部位的叶鞘；

S2:外植体处理：将选择好的斑兰外植体进行清洗、消毒、灭菌 处理；

S3:外植体制备：剥离贴着芽的叶鞘，切除嫩茎基部 1-5 mm，顶 端切到露出顶芽，再将其切成带芽茎段；

S4:不定芽诱导：按照生物学极性方向将带芽茎段下端插入不定 芽诱导培养基培养，不定芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5-1.0 mg/L+ 蔗糖 30 g/L+琼脂 5.0 g/L，调节 pH 至5.8，培养温度为 25℃-30℃， 时间为 30-50 天；

S5：不定芽壮苗和生根：将不定芽组织块切成带 4-6 个芽的小块， 转到生根壮苗培养基中，生根壮苗培养基为1/2MS+蔗糖 30 g/L+ 琼脂 5.0 g/L，调节 pH 至 5.8，其中 1/2MS 为大量元素减半，培养 20-40 天，光照培养，培养温度为25℃-30℃，伸长的不定芽基部长出 1-3 条根；

S6：切取生根苗：在生根的茎节下端切开，将带根不定芽从组织 块上分离，用于炼苗；下面的桩切成 0.5*0.5 cm 的组织块，放到不 定芽诱导培养基上诱导不定芽；

S7：炼苗：将切取下来的生根苗用有效成分为 0.5%的多菌灵溶 液浸泡根部 5-15sec，沥干后假植于沙床上进行炼苗。

2.根据权利要求 1 所述的一种低成本繁育斑兰组培苗的方法， 其特征在于，所述步骤 S2 外植体消毒步骤中，将嫩茎用流水冲洗后， 75%酒精表面消毒 30 秒，再 0. 1%氯化汞浸泡 5- 10 min ，最后用无菌 水冲洗 3-5 次，每次 2-3 分钟。

3.根据权利要求 1 所述的一种低成本繁育斑兰组培苗的方法， 其特征在于,所述步骤 S4 中的不定芽诱导培养条件如下：光照强度 1000 lx，光照时间 12 h/d，培养温度25-30℃。

4.根据权利要求 1 所述的一种低成本繁育斑兰组培苗的方法， 其特征在于,所述 S5中不定芽壮苗和生根的培养条件如下：光照强度 1000 lx，光照时间 12 h/d，培养温度25-30℃。

5.根据权利要求 1 所述的一种低成本繁育斑兰组培苗的方法， 其特征在于,所述增殖培养程序简化为“不定芽诱导-生根壮苗-不定 芽诱导”的循环增殖模式。