[发明专利]一种维生素D3的提取方法、检测维生素D3含量的方法

权利要求书

1.一种维生素D₃的提取方法，所述提取方法在避光条件下进行，包括以下步骤：

将待测物与分散剂、抗氧剂、提取剂混合，得到待测物溶液；所述分散剂为二甲基亚砜和水的混合溶液，所述抗氧剂为2，6-二叔丁基对甲酚，所述提取剂为正己烷；

将所述待测物溶液进行提纯处理，得到维生素D₃提取液。

2.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述分散剂中二甲基亚砜和水的体积比为9.8～10.2：2。

3.根据权利要求1或2所述提取方法，其特征在于，所述混合包括以下步骤：

将部分抗氧剂溶解于提取剂中，得到抗氧剂-提取剂溶液；

将剩余抗氧剂溶解于分散剂中，得到抗氧剂-分散剂溶液；

将待测物、所述抗氧剂-提取剂溶液和所述抗氧剂-分散剂溶液混合，得到待测物溶液。

4.根据权利要求3所述提取方法，其特征在于，所述抗氧剂-提取剂溶液中2，6-二叔丁基对甲酚的质量浓度为0.018～0.022％；

所述抗氧剂-分散剂溶液中2，6-二叔丁基对甲酚的质量浓度为0.18～0.22mg/mL；

所述待测物中维生素D₃的质量和抗氧剂-提取剂溶液的体积比为25μg：23～27mL；

所述抗氧剂-提取剂溶液和抗氧剂-分散剂溶液的体积比为1：1.8～2.2。

5.根据权利要求4所述提取方法，其特征在于，所述待测物、抗氧剂-提取剂溶液和抗氧剂-分散剂溶液的混合包括以下步骤：

将得到的混合体系经超声处理后进行旋涡或振摇；

所述超声处理的功率为200～400W，时间为13～17min，温度为30℃以下；

所述旋涡或振摇的时间独立为13～17min。

6.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述提纯处理包括以下步骤：

将所述待测物溶液进行第一离心处理取上层清液，得到初级提纯溶液；

将所述初级提纯溶液进行第二离心处理取上层清液，得到维生素D₃提取液。

7.根据权利要求6所述提取方法，其特征在于，所述第一离心和第二离心的转速独立的为4000r/min以上，时间独立的为4～6min。

8.一种检测维生素D₃含量的方法，包括以下步骤：

以维生素D₃提取液为待测液，所述维生素D₃提取液为权利要求1～7任一项所述提取方法提取得到的提取液；

将所述待测液注入液相色谱仪，得到待测液液相色谱图；

将维生素D₃对照品溶液注入液相色谱仪，得到对照品液相色谱图；

按照公式1计算待测物中维生素D₃含量：

其中，A_待为待测液中维生素D₃的峰面积；

M_对为维生素D₃对照品的取样量：mg；

P_对为维生素D₃对照品中维生素D₃的含量：99.8％

D_待为待测液的稀释倍数：25；

A_对为对照品溶液中维生素D₃的峰面积；

M_待为待测物的取样量：g；

D_对为维生素D₃对照品溶液的稀释倍数：10000。

9.根据权利要求8所述检测方法，其特征在于，所述液相色谱检测条件包括：色谱柱填充剂为氨基键合硅胶，柱温为25～35℃；以正己烷和异丙醇混合溶液为流动相；流速为1.3～1.7mL/min；检测波长为265nm。

10.根据权利要求9所述检测方法，其特征在于，所述正己烷和异丙醇混合溶液中正己烷和异丙醇的体积比为98.9～99.1：0.9～1.1。