[发明专利]一种靶向肝星状细胞的仿生纳米药物的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及靶向肝星状细胞的仿生纳米药物的制备方法及其应用，可有效解决目前靶向肝星状细胞的纳米载体通常是利用化学修饰的方法将靶向配体修饰在纳米药物表面，合成较为繁琐的问题，其解决的技术方案是，利用肝星状细胞的同源靶向功能，包裹诱导肝星状细胞(HSCs)凋亡的疏水性小分子药物BAY 11‑7082，通过超声共挤出的方法得到具有肝星状细胞靶向的纳米药物，本发明仿生纳米药物可以诱导肝星状细胞凋亡，减少胶原分泌，缓解炎症微环境最终达到抗肝纤维化的目的，本发明制备方法简便，生物相容性好，是仿生纳米药物上的创新。

技术领域

本发明涉及纳米药物制剂领域，特别是一种靶向肝星状细胞的仿生纳米药物的制备方法及其应用。

背景技术

肝纤维化是长期慢性肝损伤导致的肝脏持续修复的过程，其特征是各种病因导致细胞外基质(ECM)的过度沉积，其中包括胆汁酸淤积、病毒感染、酒精性肝病，以及非酒精性脂肪型肝炎等。肝纤维化是一个高度动态和可逆的过程，比其他任何类型的器官纤维化都具有更大的可塑性。小分子、蛋白质、siRNA、miRNA和质粒等多种药物被用于抗纤维化治疗。然而，迄今为止未能提供有效的抗纤维化治疗，尚未有抗肝纤维化的药物获批。肝星状细胞(HSCs)在肝纤维化的病理发展中起着关键作用。在正常肝脏中，肝星状细胞位于窦周间隙，主要功能是储存脂滴，处于静息状态。当肝脏发生慢性损伤后，肝星状细胞被激活，分化为肌成纤维细胞，具有收缩、促炎和增殖等特性，合成并分泌大量的胶原，是纤维化形成的主要驱动因素。通过调节肝星状细胞的活化，增殖或促进其凋亡来抑制肝星状细胞合成分泌胶原的能力在许多研究中表明可以减缓肝纤维化进程。肝损伤时由于肠道细菌和肠壁通透性增加，门脉系统和血液循环中的LPS水平增加。LPS通过HSCs表面TLR4活化NF-kB。活化的HSCs内NF-kB活性增加，导致炎症因子表达升高，放大肝脏炎症损伤反应，促进了HSCs存活。有研究表明NF-kB抑制剂BAY 11-7082可以诱导HSCs凋亡，延缓肝纤维化进程。由于BAY 11-7082溶解性差，全身使用会对机体产生副作用。因此，将BAY 11-7082高效递送至肝星状细胞，提高其生物利用度是肝纤维化治疗的一个有效策略。

肝脏特殊的生理解剖特征使特定粒径和表面性质的纳米颗粒在肝脏中积累。与大多数其他组织不同，肝窦内皮细胞没有基底膜，且含有窗孔。因此，在没有聚集或蛋白结合等干扰的情况下，在全身注射后，大多数纳米颗粒表现出快速的被动肝脏积聚。库普弗细胞对纳米颗粒的摄取随着纳米颗粒粒径的增加而增加。所以，大尺寸的纳米颗粒会更快地在肝脏中积累，血液循环时间也会更短。随着纳米颗粒粒径的减小，库普弗细胞对纳米颗粒的摄取也会减少，体内循环时间延长，增加了其他肝细胞对纳米颗粒的摄取机率。通常，粒径小于150nm的纳米颗粒可以避免被库普弗细胞摄取，穿过肝窦内皮细胞窗孔，然后到达肝星状细胞和肝细胞。正常的肝窦内皮细胞有窗孔，直径在50-200nm。因此，静脉注射直径小于200nm的纳米颗粒可以通过肝窦内皮细胞窗孔。然而，在纤维化肝脏中，抗纤维化药物无法顺利到达肝星状细胞中发挥作用。因为肝星状细胞只占肝细胞总数的5-8%。此外沉积在窦周间隙的ECM和内皮细胞的失窗孔化抑制了抗纤维化药物在肝脏的富集，到达肝星状细胞的药物减少了。因此靶向递送药物至肝星状细胞是成功治疗肝纤维化的关键因素，目前靶向肝星状细胞的纳米载体通常是利用化学修饰的方法将靶向配体修饰在纳米药物表面，合成较为繁琐。因此，靶向肝星状细胞的纳米载体的改进和创新是目前亟需解决的问题。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种靶向肝星状细胞的仿生纳米药物的制备方法及其应用，可有效解决目前靶向肝星状细胞的纳米载体通常是利用化学修饰的方法将靶向配体修饰在纳米药物表面，合成较为繁琐的问题。

本发明解决的技术方案是，利用肝星状细胞的同源靶向功能，包裹诱导肝星状细胞(HSCs)凋亡的疏水性小分子药物BAY 11-7082，通过超声共挤出的方法得到具有肝星状细胞靶向的纳米药物；具体包括以下步骤：