[发明专利]基于T7RNA聚合酶的融合多肽及其制备方法、用途

权利要求书

1.一种融合多肽，其中，所述融合多肽包括：具有T7 RNA聚合酶活性的第一多肽，标签多肽，和连接所述第一多肽与所述标签多肽的第二多肽；

所述第二多肽选自如下(a₁)-(a₂)组成组中的任一项：

(a₁)如SEQ ID NO:1-3任一项所示的氨基酸序列的多肽；

(a₂)与SEQ ID NO:1-3任一项所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性，且具有SEQ ID NO:1-3任一项所示的序列活性的多肽。

2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中，所述第一多肽选自如下(b₁)-(b₂)组成组中的任一项：

(b₁)如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的多肽；

(b₂)与SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性，且具有T7 RNA聚合酶活性的多肽；

优选地，所述标签多肽选自如下(c₁)-(c₂)组成组中的任一项：

(c₁)如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列的多肽；

(c₂)与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性，且具有SEQ ID NO:5所示的序列活性的多肽。

3.根据权利要求1或2所述的融合多肽，其中，所述融合多肽包括如下(d₁)-(d₂)任一项所示的序列：

(d₁)如SEQ ID NO:7、9、11任一项所示的氨基酸序列；

(d₂)与SEQ ID NO:7、9、11任一项所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性，且具有SEQ ID NO:7、9、11任一项所示的序列活性的氨基酸序列。

4.一种多核苷酸，其中，所述多核苷酸包含编码如权利要求1-3任一项所述的融合多肽的核苷酸序列；优选地，所述多肽核酸包含如下(e₁)-(e₂)任一项所示的序列：

(e₁)如SEQ ID NO:6、8、10任一项所示的核苷酸序列；

(e₂)与SEQ ID NO:6、8、10任一项所示的氨基酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性，且编码具有SEQ ID NO:7、9、11任一项所示序列活性的多肽的核苷酸序列。

5.一种重组表达载体，其中，所述重组表达载体包含如权利要求4所述的多核苷酸。

6.一种重组宿主细胞，其中，所述重组宿主细胞包含如权利要求4所述的多核苷酸或如权利要求5所述的重组表达载体。

7.根据权利要求1-3任一项所述的融合多肽，根据权利要求4所述的多核苷酸，根据权利要求5所述的重组表达载体，或者根据权利要求6所述的重组宿主细胞在如下(f₁)-(f₂)至少一种中的用途：

(f₁)起始目标核苷酸的转录，或制备用于起始目标核苷酸转录的试剂或试剂盒；

(f₂)制备RNA分子，或制备用于制备RNA分子的试剂或试剂盒；

可选地，所述RNA分子选自线性RNA分子或环状RNA分子；优选地，所述RNA分子为mRNA分子；更优选地，所述mRNA分子为环状mRNA分子。