[发明专利]一种前列腺特异性抗原的检测装置和检测方法在审

专利信息
申请号: 202111191752.7 申请日: 2021-10-13
公开(公告)号: CN114324867A 公开(公告)日: 2022-04-12
发明(设计)人: 刘凡新 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: G01N33/574 分类号: G01N33/574;G01N33/532;G01N21/65
代理公司: 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 代理人: 赵芳
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 前列腺 特异性 抗原 检测 装置 方法
【权利要求书】:

1.一种前列腺特异性抗原的检测装置,其特征在于,它是通过以下步骤制得的:

1)采用纳米压印、Au薄膜沉积及反应离子束刻蚀制备Au纳米手指有序阵列结构;

2)对前列腺特异性抗原PSA的适配体DNA溶液进行硫醇活化和还原处理,然后将所有的DNA样品在90℃热水中加热20分钟,然后在冰水浴中快速冷却,实现均匀的DNA扩增;

3)将经步骤2处理后的适配体单链DNA溶液滴加在步骤1制备的Au纳米手指有序阵列结构上进行孵育,放置在4°的冰箱里12小时,让适配体单链DNA与Au纳米手指依靠硫金键结合,单链DNA通过硫金共价键延伸的构象在金表面;

4)将步骤3处理好单链DNA修饰的Au纳米手指有序阵列结构拿出,用超纯水冲洗去未连接且多余的单链DNA溶液,再用超纯水浸泡两个小时,取出在自然条件下干燥;

5)在溶液挥发过程中,微表面张力使得相邻四个纳米手指相互靠在一起,形成以四聚体为结构单元的坍塌Au手指阵列结构,手指结构之间形成2倍DNA尺寸大小的亚纳米间隙,可产生量子等离激元调控的增强耦合电磁场,且四聚体耦合结构中的增强电磁场可不依赖入射光的偏振,便可以进行不同浓度PSA溶液的检测。

2.如权利要求1所述的检测装置,其特征在于:步骤1)中Au纳米手指有序阵列结构中的单个纳米手指的高度为300纳米,包括250纳米的聚合物柱子及上面50纳米的Au,直径为80纳米,相邻手指之间的距离为110纳米。

3.如权利要求1所述的检测装置,其特征在于,步骤2)中硫醇化的单链DNA序列为5’-HS-(CH2)6-TTT TTA ATT AAA GCT CGC CAT CAA ATA GCT TT–3′,其中T,G,A,C为不同结构的碱基分子,并用三-(2甲酰乙基)膦盐酸盐(TCEP)还原剂还原处理备用。

4.一种前列腺特异性抗原的检测方法,其特征在于,采用如权利要求1-3任一项所述的检测装置,并增加下列步骤:

6)在步骤5得到的Au/DNA/Au纳米手指阵列的耦合结构为SERS增强衬底上滴定病人的血清,衬底放到生物载玻片的凹槽中,这时前列腺特异性抗原分子PSA会被DNA适配体所捕获,通过PSA拉曼特征峰1650cm-1来识别。

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