[发明专利]一种环状非编码RNA circSTK39及其在预防和治疗动脉粥样硬化中的应用

说明书

本发明公开了一种环状非编码RNA circSTK39及其在预防和治疗动脉粥样硬化中的应用。本发明通过对小鼠AS模型中的动脉组织进行全转录组高通量测序，筛选到在晚期AS组有表达，且保守性高的环状非编码RNA——circSTK39。其中，人类中的circSTK39是由SEQ ID NO.1所示的DNA序列经转录后得到。本发明通过探究circSTK39对血管平滑肌细胞增殖迁移的调控功能，发现了circSTK39在动脉粥样硬化整个发生发展过程中发挥着重要的作用。本发明的提出使得可以在临床中通过对该靶点的筛查，对早期动脉粥样硬化及时进行药物干预，延缓甚至逆转疾病。在晚期的动脉粥样硬化筛查中，可了解患者病变发展情况，及时干预避免临床事件发生。因此，本发明的提出为预防和治疗动脉粥样硬化提供了新的分子标记和干预靶点。

技术领域

本发明涉及一种环状非编码RNA-circSTK39及其在预防和治疗动脉粥样硬化中的应用。本发明属于分子生物学领域，

背景技术

随着社会经济的发展，心血管疾病的发病率和死亡率在全球范围内不断上升，中国心血管健康与疾病报告指出，2018年心血管病死亡占我国城乡居民总死亡原因的首位，农村为46.66％，城市为43.81％，心血管疾病已成为威胁公众健康的重要疾病之一。动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)被认为是由多种因素相互作用导致的一种慢性炎症反应，是多种心脑血管疾病的主要病理基础。AS早期常表现为缓慢隐匿型增长，而晚期阶段容易出现跳跃式快速进展，导致急性临床事件的发生。

血管平滑肌细胞(VSMC)是AS斑块的重要组成部分，在AS进展过程中起到关键的作用，内皮功能受损，炎症反应刺激，VSMC发生表型转换，迁移到损伤血管内膜，发生异常增殖并分泌大量细胞外基质，参与AS早期阶段纤维帽的形成和发展，而AS晚期阶段，VSMC凋亡占主要地位，是不稳定性斑块破裂，继而发生出血和形成血栓的主要原因之一。因此VSMC的异常增殖和迁移与AS的发生发展密不可分。

环状RNA(circular RNA，circRNA)，是一类新兴的非编码RNA，在真核生物中普遍存在，表达稳定且在物种间高度保守。近年来的研究表明circRNA与包括心脏病在内的多种疾病密切相关，对人类健康有很大影响，但是绝大部分的circRNA的功能仍不清楚。本发明借助高通量测序筛选出在晚期AS动脉组织中表达且在物种间高度保守的circSTK39，通过设计干扰RNA检测其对平滑肌细胞功能的影响，并进一步通过体内转染干扰RNA的腺相关病毒载体，发现了circSTK39与动脉粥样硬化疾病的关系，有助于我们更好的理解其发病机制，从RNA水平为AS提供新的诊疗靶点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种在晚期动脉粥样硬化动脉组织中表达且在物种间高度保守的环状非编码RNA及其在预防和治疗动脉粥样硬化中的应用。

circSTK39

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明通过对小鼠AS模型中的动脉组织进行全转录组高通量测序，筛选到在晚期AS组有表达，且保守性高的circSTK39。其中，人类中的circSTK39是由核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示的DNA序列经转录后得到。小鼠中的circSTK39是由核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的DNA序列经转录后得到。通过荧光定量PCR实验发现circSTK39在人AS斑块组织中显著高表达。构建siRNA沉默小鼠主动脉平滑肌细胞(MASMC)以及人类主动脉平滑肌细胞(HASMC)的circSTK39，研究circSTK39在平滑肌细胞的增殖、迁移等功能中的作用，从而探究circSTK39在动脉粥样硬化中的作用机制。通过探究circSTK39对血管平滑肌细胞增殖迁移的调控功能，我们发现circSTK39在动脉粥样硬化整个发生发展过程中发挥着重要的作用，circSTK39具有抑制动脉粥样硬化进展的作用，可成为治疗AS的新靶点。