[发明专利]一种红树内生真菌中二萜类化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种红树内生真菌中二萜类化合物，其特征在于，所述化合物为3,5-dimethylorsellinic acid二萜类化合物，其化合物的结构式如下1～7任意一项所示：

2.如权利要求1所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物，其特征在于：所述化合物由红树植物红榄李(Lumnitzera littorea)内生真菌Penicillium sp.HLLG-1发酵分离得到。

3.如权利要求2所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物，其特征在于：所述红树植物红榄李内生真菌Penicillium sp.HLLG-1保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20211162。

4.如权利要求3所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物，其特征在于：所述红树植物红榄李内生真菌Penicillium sp.HLLG-1的DNA序列如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

5.一种如权利要求1所述的红树内生真菌中二萜类化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、菌种活化：取出保藏的内生真菌Penicillium sp.HLLG-1置于培养箱中预培养24小时后，转接至无菌PDA平板活化，于培养箱中培养2-4天；

S2、种子液配置：取步骤S1的内生真菌Penicilliumsp.HLLG-1菌体接入无菌的土豆液体培养基中，于28℃恒温摇床培养2-3天，得种子液；

S3、浸膏制备：将种子液接种至无菌的土豆液体培养基中，于28℃恒温静置发酵培养30-40天，得到发酵物，并采用有机溶剂浸泡2-3次，减压浓缩，得到粗浸膏；

S4、层析分离：将粗浸膏进行硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯溶剂100:0--0:100,v/v，依次进行梯度洗脱，分离得到红树内生真菌中二萜类化合物。

6.如权利要求5所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述内生真菌Penicillium sp.HLLG-1保藏于-80℃，PDB-30％甘油培养基中；培养箱的恒温培养温度均为28℃。

7.如权利要求5所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S2和3中的土豆液体培养基配方包括土豆200g/L，葡萄糖20g/L。

8.如权利要求5所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述发酵物为菌丝体和菌悬液，采用等体积的乙酸乙酯作为有机溶剂浸泡提取2-3次，合并提取液，减压浓缩，得到粗浸膏。

9.一种如权利要求1～8中任意一项所述的红树内生真菌中二萜类化合物的应用，其特征在于：所述化合物用于制备抗肿瘤细胞抑制剂中的应用。

10.如权利要求9所述的一种红树内生真菌中二萜类化合物的应用，其特征在于：所述化合物在制备癌细胞系A549、HCT116、HePG2、MCF-7、H929和HL-60抑制药物中的应用。