[发明专利]分泌ST2抗体的杂交瘤细胞株及其应用在审
| 申请号: | 202111082050.5 | 申请日: | 2021-09-15 |
| 公开(公告)号: | CN113846066A | 公开(公告)日: | 2021-12-28 |
| 发明(设计)人: | 杭海英;安莉莉;冉凡磊;赵云;罗蕊琪 | 申请(专利权)人: | 海珂分子(北京)科技有限责任公司;中国科学院生物物理研究所 |
| 主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/28;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/68 |
| 代理公司: | 北京市诚辉律师事务所 11430 | 代理人: | 范盈 |
| 地址: | 101400 北京市怀柔区雁栖经济*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 分泌 st2 抗体 杂交瘤 细胞株 及其 应用 | ||
本发明提供了能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株分泌的ST2的抗体可以高效的用于双抗体夹心法对ST2进行检测,本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗,可用于制备双抗夹心ELISA检测ST2所需的配对单克隆抗体,在优选的实施方式中,用于血液中ST2蛋白的双抗夹心ELISA检测。
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种产生/分泌ST2抗体的杂交瘤细 胞株以及其应用。
背景技术
ST2是白介素1受体家族的成员,也称为生长刺激表达基因2蛋白。ST2 有两个主要亚型:跨膜型或细胞型(ST2L)和可溶性型或循环型(sST2)。ST2 是白介素33(IL-33)的受体,IL-33被认为是一种核因子,通过结合心肌细胞 膜表面受体ST2L,启动下游信号传导通路,保护心肌,改善心肌功能,而ST2 与ST2L竞争结合IL-33,降低IL-33/ST2L系统保护心脏的功效。研究显示, 急性失代偿心衰患者ST2>35ng/ml时,一年内患者死亡与心衰再住院风险显 著增高,一年内死亡率与ST2浓度呈正相关。ST2检测在临床应用中的价值受 到了越来越多的关注。
双抗体(原)夹心法,通常是结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其 免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。受 检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成 的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。加入酶标记的抗原或抗体,通过 反应也结合在固相载体上。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物, 产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据呈色的深浅进行定性或定量分 析。酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高 的敏感度。
对于ST2的免疫学检测,获得高质量的ST2抗体至关重要,尤其是能用 于ST2的双抗体夹心法检测的抗体至关重要。
发明内容
本发明提供了能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞 株分泌的ST2的抗体可以高效的用于双抗体夹心法对ST2进行检测。
本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗,可用于制备双抗夹心ELISA检测ST2 所需的配对单克隆抗体,在优选的实施方式中,用于血液中ST2蛋白的双抗夹 心ELISA检测。
本发明中,分泌2#、4#和6#单克隆抗体的杂交瘤细胞株分别为7G3、4C8 和11G5,相关杂交瘤细胞株已于2021年6月10日保藏于中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏单位地址:北京市朝阳区北辰 西路1号院3号,邮编:100101,电话:010-64807355;其中,杂交瘤细胞7G3 的保藏编号为CGMCC No.22353,杂交瘤细胞4C8的保藏编号为CGMCC No.22355,杂交瘤细胞11G5的保藏编号为CGMCC No.22354。
一方面,本发明提供了分泌ST2(生长刺激表达基因2蛋白)抗体的杂交 瘤细胞,所述杂交瘤细胞选自上述杂交瘤细胞株分别为7G3、4C8和11G5中 的一种或任意几种组合。
另一方面,本发明还提供了ST2的单克隆抗体,所述单克隆抗体由上述杂 交瘤细胞分泌产生。
另一方面,本发明还提供了上述杂交瘤细胞在制备ST2的单克隆抗体中的 应用。
另一方面,本发明还提供了一种检测ST2的试剂盒,所述试剂盒包括上述 杂交瘤细胞或上述单克隆抗体。
另一方面,本发明还提供了上述杂交瘤细胞或上述单克隆抗体在检测ST2 中的应用,或者在制备检测ST2的试剂盒中的应用。
在优选的实施方式中,所述试剂盒为ELISA检测试剂盒,更优选,采用 ELISA双抗体夹心法检测ST2蛋白。
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