[发明专利]一种高纯度胶原蛋白提取工艺有效
申请号: | 202111067335.1 | 申请日: | 2021-09-13 |
公开(公告)号: | CN113563460B | 公开(公告)日: | 2022-03-11 |
发明(设计)人: | 夏伟;张智武;唐冬慧 | 申请(专利权)人: | 浙江崇山生物制品有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/14 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 刘俊玲 |
地址: | 311100 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯度 胶原 蛋白 提取 工艺 | ||
1.一种胶原蛋白提取工艺,其特征在于:包括以下步骤:
(1)跟腱预处理步骤;
所述的跟腱预处理步骤还包括以下分步骤:
①将跟腱解冻,去除血水和表面筋膜,纯化水清洗后,用酒精浸泡,然后用纯化水冲洗三遍,放入冰箱中,冷冻备用;
②待跟腱完全冻硬后取出,将跟腱表面残余的脂肪膜去掉,然后进行切片处理,得到跟腱切片;
③取跟腱切片进行以下处理:
第一步:采用过氧乙酸浸泡,然后用纯化水清洗三次;
第二步:重复第一步处理一次;
第三步:用磷酸三丁酯和吐温80混合溶液浸泡,用纯化水清洗三次;
第四步:用氢氧化钠和TritonX-114混合溶液浸泡,纯化水清洗三次;
第五步:用氯化钠和碳酸钠混合溶液浸泡,用纯化水清洗三遍后,将跟腱碎片冻干后研磨成粉末,得到跟腱粉末,备用;
(2)胶原蛋白提取纯化步骤;
第一步中所述的过氧乙酸的浓度为0.2%-0.5%;浸泡时间为2-5分钟;
第三步中所述的磷酸三丁酯的浓度为0.2%-0.5%;所述的吐温80的浓度为0.1%-0.5%;浸泡时间为3-6分钟;所述的磷酸三丁酯和吐温80混合溶液的浓度比例为1-2:1;
第四步中所述的氢氧化钠的浓度为0.1%-0.3%;所述的TritonX-114的浓度为0.1%-0.5%;浸泡时间为2-6分钟;所述的氢氧化钠和TritonX-114混合溶液的浓度比为1-3:1;
第五步中所述的氯化钠的浓度为0.9%,所述的碳酸钠的浓度为0.1%-0.5%;浸泡时间为1.5-2.5小时;所述的氯化钠和碳酸钠混合溶液的浓度比为1:0.2-0.5。
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取工艺,其特征在于:所述的跟腱预处理步骤还包括以下分步骤:
①将跟腱解冻,去除血水和表面筋膜,纯化水清洗后,用75%酒精浸泡8分钟,然后用纯化水冲洗三遍,放入冰箱中,冷冻备用;
②待跟腱完全冻硬后取出,将跟腱表面残余的脂肪膜去掉,然后进行切片处理,得到跟腱切片;
③取跟腱切片进行以下处理:
第一步:采用0.4%的过氧乙酸浸泡3分钟,然后用纯化水清洗三次;
第二步:重复步骤a处理一次;
第三步:用0.4%的磷酸三丁酯和0.2%的吐温80混合溶液浸泡5分钟,用纯化水清洗三次;
第四步:用0.3%的氢氧化钠和0.2%的TritonX-114混合溶液浸泡5分钟,纯化水清洗三次;
第五步:用0.9%的氯化钠和0.3%的碳酸钠混合溶液浸泡2小时,用纯化水清洗三遍后,将跟腱碎片冻干后研磨成粒径为0.1毫米的粉末,得到跟腱粉末,备用。
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