[发明专利]乌蛇止痒丸的指纹图谱构建和检测方法

说明书

本发明涉及一种乌蛇止痒丸的指纹图谱构建和检测方法，构建方法包括如下步骤：取对照品和乌蛇止痒丸样品，分别制备对照品溶液和供试品溶液；采用高效液相色谱法对对照品溶液和供试品溶液进行检测，获得相应检测图谱和对照图谱；将检测图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析，生成标准指纹图谱，参照对照图谱对检测图谱的色谱峰进行指认，获得具有标识性的乌蛇止痒丸的指纹图谱。本发明构建得到乌蛇止痒丸的指纹图谱，色谱峰丰富，且包含防风、蛇床子、关黄柏、牡丹皮、当归等多味药材的有效成分，能够更全面地反应乌蛇止痒丸的整体化学成分为乌蛇止痒丸的整体质量控制及评价提供了有效手段，提高了乌蛇止痒丸质量控制的准确性和全面性。

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是一种乌蛇止痒丸的指纹图谱构建和检测方法。

背景技术

乌蛇止痒丸由乌梢蛇、防风、蛇床子、关黄柏、苍术、红参须、牡丹皮、蛇胆汁、苦参、人工牛黄和当归等11味中药组成，具有养血祛风、燥湿止痒的功效，主要用于风湿热邪蕴于肌肤所致的慢性荨麻疹、皮肤瘙痒症。作为一种中成药，乌蛇止痒丸成分复杂，一般通过多靶点、多作用途径起效。因此，基于多成分对乌蛇止痒丸进行质量控制尤为重要。

而传统的乌蛇止痒丸质量控制方法主要是基于单个成分进行的，例如已报道的乌蛇止痒丸的薄层色谱鉴别、盐酸小檗碱的HPLC含量测定方法(王蔚等发表的“RP-HPLC法测定乌蛇止痒丸中小檗碱含量”以及2020版《中国药典》)以及苦参碱的薄层扫描含量测定方法(郑晓晴等发表的“乌蛇止痒丸质量标准的研究”)。

基于单个成分对乌蛇止痒丸进行质量检测不能全面反映乌蛇止痒丸的物质基础，进而无法实现对乌蛇止痒丸的整体质量控制及评价。因此，如何全面反映乌蛇止痒丸的物质基础从而为乌蛇止痒丸的整体质量控制和评价提供有效技术手段是目前亟待解决的技术问题。

发明内容

基于以上背景技术，本发明的主要目的是提供一种乌蛇止痒丸的指纹图谱构建方法，采用该方法构建的指纹图谱结合多种化学成分的定量分析能够全面地反映乌蛇止痒丸整体化学成分，为乌蛇止痒丸的整体质量控制及评价提供了有效手段。本发明的另一目的是提供一种乌蛇止痒丸的检测方法。本发明的还一目的是提供一种乌蛇止痒丸的多成分含量检测方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种乌蛇止痒丸的指纹图谱的构建方法，所述构建方法包括如下步骤：

取对照品和乌蛇止痒丸样品，分别制备对照品溶液和供试品溶液；采用高效液相色谱法对所述对照品溶液和所述供试品溶液进行检测，获得相应的检测图谱和对照图谱；将所述检测图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析，生成标准指纹图谱，参照所述对照图谱对所述标准指纹图谱的色谱峰进行指认，获得乌蛇止痒丸的指纹图谱；

所述对照品包含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rc、人参皂苷F1、人参皂苷Rd、人参皂苷F2、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷、升麻素、亥茅酚苷、蛇床子素、欧前胡素、花椒毒酚、花椒毒素、佛手柑内酯、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸黄柏碱、盐酸药根碱、丹皮酚、芍药苷、丹皮酚原苷、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、木兰花碱、掌叶防已碱、柠檬苦素、黄柏酮、胆红素和二氢欧山芹醇当归酸酯中的至少一种；

检测所采用条件包括：固定相采用C8色谱柱或者C18色谱柱，流动相A为水或者甲酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱。