[发明专利]一种绣球菌的液体培养方法、冻干粉末及其应用

说明书

本发明属于绣球菌栽培技术领域，尤其涉及一种绣球菌的液体培养方法、绣球菌干燥粉末及应用。本发明提供的绣球菌的液体培养方法，采用绣球菌MH‑3(保藏编号FERM P‑17221)作为初始培养菌株，短时间内即可培养得到含有高浓度(60重量％以上)的β‑1,3‑D‑葡聚糖(6分歧)的绣球菌液体培养液。与子实体产品相比，本发明的菌丝体绣球菌液体培养液制备绣球菌干燥粉末，可以稳定地得到含有高浓度(60重量％以上)的β‑1,3‑D‑葡聚糖(6分歧)的绣球菌干燥粉末，该绣球菌干燥粉末可应用于制备各种功能性食品、药品、饮料、保健品、化妆品原料的液体化使原材料的均匀性和含量的稳定性成为可能。

技术领域

本发明属于绣球菌产业化开发技术领域，尤其涉及一种绣球菌的液体培养方法、绣球菌冻干粉末及从绣球菌冻干粉末提取β-1,3-D-葡聚糖的方法和绣球菌冻干粉末的应用。

背景技术

绣球菌，又名绣球菇，拉丁学名为Sparassis crispa，是非褶孔菌目、绣球菌科、绣球菌属。绣球菌是非常珍稀名贵的食药兼用菌，生长在诸如落叶松之类的针叶树上，因其具有超高的激活免疫能力，在日本有“万菇之王”、“梦幻神奇菇”之称。绣球菌含有大量的蛋白质、碳水化合物、多种维生素、多种氨基酸及膳食纤维和灰分、矿物质等。其中，绣球菌含有大量的β-葡聚糖，β-葡聚糖是一种生物活性物质，具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血糖、降血脂、保肝、提高造血功能等多种功能。发明人在推进对绣球菌的生物活性的研究时，发现绣球菌的溶媒提取物中含有β-1，3-D-葡聚糖(6分歧)，并获得了绣球菌提取物的专利(专利文献一：JP 4183326 B2)。

绣球菌生长缓慢，难以进行工业化人工栽培。专利文献二(JP3509736B2)公开了基于木材菌床的子实体(蘑菇)人工栽培种植技术培养得到了绣球菌MH-3(保藏编号NITEFERM BP-17221)。专利文献二的技术主要是用大锯屑制成人工栽培用的菌床，进行绣球菌的人工栽培，栽培期约在3-4个月左右，可以在短时间内低成本地进行人工栽培绣球菌，但不能保证生产出的绣球菌中都含有生理活性成分β-1,3-D-葡聚糖(6分歧)。现有技术提供的绣球菌产品中β-1,3-D-葡聚糖(6分歧)的含量也因为菌株和培养方法的不同而产生巨大差异。

菌丝(hyphapl.hyphae)是构成真菌主体部分的丝状结构。由菌丝构成的菌类体名为菌丝体(mycelium pl.mycelia)。由单个菌丝蔓延到树干，通过菌丝中的酶，分解和吸收树干的养分来获得生长。从树皮上长出来繁殖为子实体的结构，从外表看像是蘑菇。每个菌丝是可以单独维持生命的一个单位，甚至菌丝被分割，也可以继续生长。菌丝细胞壁的主要成分是多糖，其中大部分是甲壳素，包括β葡聚糖和壳聚糖。绣球菌Sparassis crsipa(蘑菇)由菌丝聚集而构成。绣球菌Sparassis crsipa(蘑菇)与其他蘑菇不同，是一种棕色腐殖质的蘑菇，从根部的尖端部分(土壤下)长出来，不是从树干长出来的，其菌丝和子实体生长都十分缓慢，子实体与霉菌共生。

由于人工固体栽培技术中菌丝生长缓慢，一直以来对各类菌丝的液体培养都在研究和试生产，但到目前为止，还未见关于绣球菌Sparassis crispa菌丝体的液体培养的成熟技术，更未见对绣球菌菌丝中所含的各种活性成分进行提取和分析的研究报道。因此，亟需开发一种绣球菌Sparassis crispa液体培养方法及其液体培养基提取稳定高浓度高纯度β-1,3-D-葡聚糖(6分歧)的技术来填补该技术领域的空白。

发明内容

鉴于背景技术存在的上述技术问题，需要提供一种绣球菌的液体培养方法、绣球菌冻干粉末及其应用，所述绣球菌的液体培养方法需兼具培养绣球菌的周期短，以及培养得到的绣球菌含有稳定高浓度的β-1,3-D-葡聚糖(6分歧)的优点，并且，从绣球菌的该液体培养基中得到的冷碱提取物能够保持稳定的高浓度和高纯度β-1,3-D-葡聚糖(6分歧)。

为实现上述目的，在本发明的第一方面，发明人提供了一种绣球菌的液体培养方法，包括：