[发明专利]一种基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法

权利要求书

1.一种基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法，其特征在于：该方法基于正负电荷吸附原理的外泌体富集装置，分离富集体液或培养基中外泌体。

2.根据权利要求1所述基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法，其特征在于：所述体液为血液、尿液、唾液、乳汁、羊水之一种或多种生物液体。

3.根据权利要求1所述基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法，其特征在于：所述基于正负电荷吸附原理的外泌体分离富集装置由内外两部分组成，其中：外部为带有通道的反应池，内部为吸附外泌体的壳聚糖多孔吸附材料；

所述带有通道的反应池设置有下述结构：

——反应池底部平板：位于整个反应池的底部；

——反应池上层板：位于反应池底部平板之上；

所述反应池上层板设置有下述结构：

——反应池上层板样品分离通道：位于反应池上层板上；

——反应池上层板样品出入口：位于反应池上层板样品分离通道两端；

所述吸附外泌体的壳聚糖多孔吸附材料位于反应池上层板样品分离通道内部，由反应池上层板样品出入口置入，位于反应池底部平板上方。

4.按照权利要求1所述基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法，其特征在于：所述基于正负电荷吸附原理的外泌体分离富集装置满足下述要求之一或其组合：

其一，所述带有通道的反应池的材料为聚甲基丙烯酸甲酯，反应池底部平板高度为0.1-5cm，反应池上层板高度为0.1-5cm；反应池底部平板和反应池上层板长度相同，均为5-20cm，宽度相同，均为2-15cm；

其二，所述反应池上层板样品分离通道高度为0.1-3cm，长度为2-10cm，宽度为0.5-2cm；通道个数为1-20个；

其三，所述吸附外泌体的壳聚糖多孔吸附材料是长方体结构，材料边长为0.1-1cm。

5.按照权利要求1或3所述基于外泌体富集装置的外泌体分离富集方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)取待分离样品，离心或过滤后测量pH值，加入pH为5-6的2-(N-吗啉代)乙磺酸缓冲液,将溶液的pH调整为6；

(2)将混合好的样品从反应池上层板样品出入口加入至装置中，放在摇床上震荡，震荡时间为10-40min；

(3)震荡结束后使用2-(N-吗啉代)乙磺酸缓冲液冲洗通道1-3次除去多余的样品及未吸附的其它残留物质，外泌体即被富集在壳聚糖多孔吸附材料上；

(4)除去通道中液体，将pH为7-8的磷酸盐缓冲盐溶液从反应池上层板样品出入口注入到通道中，静置5-10min后从样品出口吸出。