[发明专利]一种样本AFAI-DESI检测方法及其应用

权利要求书

1.一种样本AFAI-DESI检测方法，包括：将组织样本冰冻切片后获得的样片染色，采用AFAI-DESI进行检测，水平位移速率为0.03-0.05mm/s，垂直位移距离为0.01-0.03mm，雾化气流量为0.65-0.75MPa，喷雾溶剂流速为5.5-6.5μL/min，喷针伸出的长度为0.45-0.55mm，DESI喷针与载玻片之间的夹角为45-55°。

2.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述组织样本冰冻切片包括：将组织样本冰冻后解冻、固定、切片，粘附于玻片上，获得的样片再进行冰冻保存，待用。

3.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述染色包括以下步骤：

1)将样片浸没在甲醇中固定，再浸没在纯水后，再浸没在苏木素中进行第一次染色形成蓝化，然后浸没在盐酸乙醇中分化；

2)将分化后的样片浸没在纯水中水洗后，再浸没在伊红中进行第二次染色，然后浸没在梯度乙醇中脱水，浸没在二甲苯中透化，中性树胶封片。

4.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述AFAI-DESI的检测条件为：喷雾电压为0V；传输管电压为0V；扫描极性为正/负离子模式；毛细管温度为350℃；辅助气温度为0℃；扫描模式为全扫描scan；扫描范围为100-1000Da；分辨率为70000。

5.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述AFAI-DESI进行检测时，质谱成像平台采用逐行扫描方式，扫描速度为0.035-0.045mm/s；相邻两个扫描行之间的步进间距为0.015-0.025mm；每一行扫描结束后的延迟时间为6-8ms；返回到同一行的扫描起点的速度为9-11mm/s。

6.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述AFAI-DESI进行检测时，喷雾点状态条件为：雾化气流量为0.69-0.71MPa；喷雾溶剂流速为5.9-6.1μL/min；喷针伸出的长度d2为0.49-0.51mm。

7.根据权利要求1所述的一种样本AFAI-DESI检测方法，其特征在于，所述AFAI-DESI进行检测时，空间几何参数为：DESI喷针与载玻片之间的夹角α1为49-51°；离子传输管与载玻片之间的夹角α2为14-16°；喷针距离载玻片的垂直距离d1为1.9-2.1mm；喷雾点距离离子传输管的水平距离d3为1-3mm；离子传输管下缘距离载玻片距离d4为0.98-1.02mm。

8.根据权利要求1-7任一所述的一种样本AFAI-DESI检测方法在微米级小尺寸样本空间代谢组成像分析中提高空间分辨率上的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述样本选自小鼠眼球组织、小鼠肾脏肾小球组织或小鼠胚胎组织中的一种或多种组合。

10.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述样本的空间分辨率≥20μm。