[发明专利]一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法

说明书

一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法，属于医药技术领域，大青叶进行预处理并用有机溶剂振摇进行提取，然后将提取液用高效液相色谱进行检验，包括以下步骤：S1精密称取靛蓝、靛玉红对照品适量，加入含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液制成对照品溶液；S2取大青叶，研细，过三号筛，精密称取适量粉末，置具塞锥形瓶中，加入适量含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液后称定重量，振摇，再称定重量，用含磷酸的N,N‑二甲基甲酰胺溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；S3色谱条件：C18色谱柱，以甲醇‑水70：30为流动相，检测波长为289nm；S4分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法。

背景技术

大青叶是我国的传统中药，为十字花科植物菘蓝Isatisindigotica Fort.的干燥叶，具有清热解毒、凉血消斑的功效，含有靛蓝、靛玉红等活性成分。大青叶现行质量标准收载于《中国药典》2020年版一部，有靛玉红的含量测定项，采用三氯甲烷提取、高效液相色谱法测定的方法。其他研究文献也多为测定靛玉红含量的方法，提取方法也多采用三氯甲烷提取、醇提等，普遍存在耗时长、操作繁琐等问题。靛蓝是一种蓝色粉末，能溶于热苯胺，几乎不溶于乙醇，不溶于水、酸、碱，有机溶剂中可溶，如乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯等，而靛蓝在这些溶剂中存在一定对光和热的不稳定性，测定时普遍存在难提取、重现性差等问题。现有技术中未见有用高效液相色谱法同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的文献报道，该方法的建立需要解决引起靛蓝难提取的一系列问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法，该方法能够解决靛蓝难提取的问题，准确方便的同时进行大青叶中靛蓝和靛玉红含量的检测。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法，所述大青叶进行预处理并用有机溶剂进行提取，然后采用高效液相色谱进行检验。

一种同时测定大青叶中靛蓝和靛玉红含量的方法，包括以下步骤：

S1：对照品溶液的制备：精密称取靛蓝、靛玉红对照品适量，加入含磷酸的N,N-二甲基甲酰胺溶液制成对照品溶液；

S2：供试品溶液的制备：取大青叶适量，研细，过三号筛，精密称取适量粉末，置具塞锥形瓶中，加入适量含磷酸的N,N-二甲基甲酰胺溶液后称定重量，振摇，再称定重量，用含磷酸的N,N-二甲基甲酰胺溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

S3：高效液相色谱法进行测定，色谱条件：C18色谱柱，以甲醇-水(70：30)为流动相；检测波长为289nm；

S4：测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述含磷酸的N,N-二甲基甲酰胺溶液中磷酸的浓度范围：4％～6％。

本发明技术方案的进一步改进在于：步骤S2中振摇时间30～50分钟。

本发明技术方案的进一步改进在于：步骤S3色谱条件中柱温25～35℃，流速为0.9～1.1ml/min。

由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术效果如下：

本申请解决了靛蓝难提取的问题，多次检测结果显示方法准确可靠、灵敏、专属性强，各项指标均符合质量控制的要求，该含量测定方法可以适用于大青叶的质量控制，并且可以同时检测出大青叶中靛蓝与靛玉红的含量。

具体实施方式

一种同时测定大青叶中靛蓝与靛玉红含量的方法：