[发明专利]一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法

权利要求书

1.一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，由以下步骤提取：

S1，将盾叶薯蓣根茎粉碎过80-100目筛，加入5-6倍体积的去离子水浸泡1-2h，用醋酸钠-醋酸缓冲液调节pH至6.5，然后加入酶在40℃下酶解45-55min，90℃酶灭活后，调节PH至中性，加入十二烷基硫酸钠水溶液、氯化镁溶液，浸泡3-4h，再经24-26KHz超声处理30-40min，然后4000-5000r/min离心15-20min，取上清液，过滤，得超声提取液；

S2，将硫酸溶液加入到超声提取液中，于105℃下搅拌水解2-3h，水解后用饱和碳酸钠溶液中和至中性，得薯蓣皂苷元水解液，然后将薯蓣皂苷元水解液置于泡沫分离器的储料桶中，通入氮气，通过环流泡沫塔气泡，向泡沫槽鼓出泡沫；

S3，将蛋黄卵磷脂、胆固醇混合溶于氯仿中，然后于45℃下旋转蒸发，去除有机溶剂，得干燥脂质膜，氮气条件下保存；将泡沫槽的泡沫通过磷酸盐缓冲盐溶液冲洗，流入到到干燥脂质膜中，旋转蒸发后，形成脂质体悬液，然后于冰水浴超声10-15min，超声完成后，继续37℃旋转蒸发60min，最后用0.22um微孔滤膜过滤，得薯蓣皂苷元传递体；

S4，将壳聚糖溶液滴入薯蓣皂苷元传递体，室温下100-150rpm搅拌2-3h，得薯蓣皂苷元壳聚糖传递体；

所述十二烷基硫酸钠水溶液的浓度为2.58×10^-2mol/L；所述的氯化镁溶液的浓度为0.2mol/L；

所述的酶添加量为盾叶薯蓣根茎的2%，所述的酶由10000U/g的中性纤维素酶和10000U/g的果胶酶以1.8:0.2的比例组成；

所述的硫酸溶液的浓度为0.5mol/L；

所述的壳聚糖溶液为取分子量为150kDa的壳聚糖溶解于0.5%w/v冰醋酸溶液中，制备成浓度为0.3%的壳聚糖溶液，所制备的壳聚糖溶液PH值为6.5。

2.根据权利要求1所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述的盾叶薯蓣根茎:十二烷基硫酸钠水溶液:氯化镁溶液的质量体积比为10-15g:5-10mL:2-3mL；所述十二烷基硫酸钠水溶液的浓度为2.58×10^-2mol/L；所述的氯化镁溶液的浓度为0.2mol/L。

3.根据权利要求1所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述的超声提取液:硫酸溶液的体积比为8-10:1.6-2；所述的硫酸溶液的浓度为0.5mol/L。

4.根据权利要求1所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述的蛋黄卵磷脂:胆固醇:氯仿:磷酸盐缓冲盐溶液的质量体积比为3-5g:1-2g:10-12mL:12-15mL；所述的磷酸盐缓冲盐溶液的PH为7.4。

5.根据权利要求1所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述的壳聚糖溶液与薯蓣皂苷元传递体的体积比为2-3mL:16-24mL；所述的壳聚糖溶液为取分子量为150kDa的壳聚糖溶解于0.5%w/v冰醋酸溶液中，制备成浓度为0.3%的壳聚糖溶液，所制备的壳聚糖溶液PH值为6.5。

6.根据权利要求1所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述的泡沫分离器包括储料桶，储料桶底部呈圆斗形，储料桶底部通过第一压力泵与环流泡沫塔的底部连通，环流泡沫塔的底部设有氮气通入导管，所述环流泡沫塔由塔体、导流筒、气体分布器和泡沫槽构成，导流筒位于塔体的内部，与塔体的内塔壁形成环隙，气体分布器位于塔体内底部和导流筒的内部的下部，气体分布器与氮气通入导管连通，所述塔体的中上部设有清液出口，所述清液出口位于导流筒与塔体的内塔壁形成的环隙的中上部；导流管的上方设有泡沫槽，塔体上部伸入泡沫槽密封连接，泡沫槽的内部上方设有喷洒器，喷洒器可水平反方向向泡沫槽的内壁喷洒，喷洒器通过第二压力泵连通容器的底部，泡沫槽的最低位置设有开口，开口与两口烧瓶密封连接，两口烧瓶的另一开口设有出气口。

7.根据权利要求6所述的一种薯蓣皂苷元壳聚糖传递体的制备方法，其特征在于，所述第一压力泵应保证通入其中的液体流速不超过10mL/s；所述气体通入速度15mL/s。