[发明专利]一种桑叶中活性物质的提取方法

说明书

本发明涉及生物活性物质提取技术领域，具体来说是一种桑叶中活性物质的提取方法，本发明先采用桑叶超微粉和纤维素酶进行超声处理，通过酶法和机械粉碎法共同实现细胞的破裂；再对溶出物采用多次温度交替重复沉积操作，并经由茚三酮来进行确定，通过巨大的温差实现提升桑叶提取液中的蛋白质的脱除率；最后采用表面活性剂进行辅助水提操作，实现对目标组分的分离，提高目标成分的纯度。本发明在有效去除蛋白的基础上，同时实现了桑叶中桑叶多糖、生物碱和桑叶黄酮的提取，并研究了其三者的协同作用。

技术领域

本发明涉及生物活性物质提取技术领域，具体来说是一种桑叶中活性物质的提取方法。

背景技术

我国是世界上最大的桑树种植国，桑叶是我国的传统中药，为桑科(Moraceae)桑属植物桑(MorusalbaL.)的叶；因其具有疏风散热，润燥清肺，清肝明目的作用，较广泛的用于治疗风热感冒，头晕头痛，肺热燥咳，目赤昏花；桑叶含有多种功能成分，如桑叶黄酮、多酚、桑叶多糖、生物碱、植物甾醇、氨基酸以及其他未知的对人体具有医疗保健作用的活性物质。

陈建国等人指出：桑叶多糖具有调节糖代谢、降低血糖、改善糖尿病症状的作用；研究发现桑叶中的生物碱主要成分为1-脱氧野尻霉素，其具有显著降血糖作用；将类黄酮与生物碱结合能更有效的抑制血糖上升，表明类黄酮与桑叶生物碱有一定的协同作用；现有技术也发现桑叶多糖、生物碱有一定的协同配伍作用；可见，若能够得到桑叶多糖、生物碱和桑叶黄酮的提取物，并研究其三者的协同降糖作用是十分有意义的。

而桑叶中叶蛋白含量较高，也是我国植物中叶蛋白含量较高的一种，据研究表明，桑叶中蛋白质含量高达20％以上，且其氨基酸接近瘦猪肉、鸡肉等，但是对于降糖作用来讲不具有实际意义，且当提取物中叶蛋白含量增加后，其与活性成分的混合物影响了活性成分的浓度，使得一定量的提取物中活性成分作用下降，所以需要一种除蛋白充分的、且主要成分为桑叶多糖、生物碱、桑叶黄酮的提取分离方法，得到桑叶多糖、生物碱和桑叶黄酮的混合提取物。

且现有技术的提取工艺主要在于单一成分的提取，并研究单一成分的作用，在现有技术已经公开协同作用更佳的基础上，单一成分的提取不仅造成有益成分的浪费，而且增加了操作工序和成本。

发明内容

针对上述存在的技术不足，本发明的目的是提供一种桑叶中活性物质的提取方法，本发明的原理在于：在有效去除蛋白的基础上，同时实现桑叶中桑叶多糖、生物碱和桑叶黄酮的提取，并通过三者的协同作用研究其在降糖中的应用。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种桑叶中活性物质的提取方法，包括如下步骤：

(1)将桑叶超微粉和纤维素酶加入至pH为3.5-6.5的溶液中，并进行超声处理，得到溶出物；

(2)将步骤(1)的溶出物进行多次温度交替重复沉积操作，温度交替重复沉积方法为：先于100℃加热8-12min，后于-15～-5℃冷冻1-2h，沉积操作结束后于室温条件下离心，得下清液；

(3)将步骤(2)的下清液pH调节至中性，然后加入桑叶黄酮提取表面活性剂的乙醇溶液、桑叶多糖提取表面活性剂的乙醇溶液、桑叶生物碱提取表面活性剂的乙醇溶液，并进行超声处理，然后经萃取、蒸干，得到桑叶活性物质。

优选的，所述步骤(1)中pH为3.5-6.5的溶液为稀盐酸或稀硫酸溶液，且溶液的体积与桑叶超微粉的质量之比为15-20mL:1g。

优选的，所述步骤(1)的超声处理条件为：室温下，于150-200W条件下超声40-60min。

优选的，所述步骤(1)的桑叶超微粉与纤维素酶的质量比为100:2-5。

优选的，所述步骤(2)的温度交替重复沉积操作的次数由茚三酮确定，直至下清液中茚三酮检测呈阴性。