[发明专利]一种土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法及动物模型

权利要求书

1.一种土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法，其特征在于，其包括如下步骤：

S1：采集污染场地含苯并[a]芘的土壤样品；

S2：将土壤样品制备为实验动物的生物暴露样品；

S3：构建基于啮齿类实验动物暴露的标准化动物模型，以苯并[a]芘为标志物，根据设定的生物暴露方式和剂量，将生物暴露样品灌胃给实验动物，在染毒后达到预定的体内代谢时间点后，分别对实验动物进行血液采样；

S4：将在设定的多个代谢时点采集的实验动物血样，分别制备为待检测全血样品；

S5：对各全血样品进行前处理，然后，采用气相色谱/质谱联用仪测定其中苯并[a]芘的浓度含量；

S6：计算出各个代谢时点、基于实验动物的苯并[a]芘相对生物有效性；

S7：计算出基于动物试验的苯并[a]芘相对生物有效性的场地土壤污染物经口暴露的实际暴露量数据；

S8：基于实际暴露量数据，进行环境健康风险评价。

2.根据权利要求1所述土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法，其特征在于，所述的步骤S1，污染场地土壤样品的采集和处理，具体包括如下步骤：

选取土壤中含苯并[a]芘的场地，在该场地污染核心区用土钻采集地表至10cm深的土壤样品不少于5份，混合装袋，带回实验室自然风干后，用手工研磨，过300目筛，使得其粒径小于50μm，制得土样。

3.根据权利要求1所述土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法，其特征在于，所述的步骤S2，制备生物暴露样品，具体包括如下步骤：

初步检测场地土壤中苯并[a]芘浓度值，根据实验动物体重，给予设定比例苯并[a]芘的暴露剂量；按照实验动物体重准备土样，并用植物油为溶剂制备苯并[a]芘土样悬浊液待用；另使用苯并[a]芘标准品，配置出相同剂量的苯并[a]芘标准品油溶灌胃制剂。

4.根据权利要求1所述土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法，其特征在于，所述的步骤S3，具体包括如下步骤：

选取啮齿类实验动物构建基于暴露的标准化动物模型，准备符合实验条件的多只实验动物作为实验组，根据设定的暴露剂量，将生物暴露样品苯并[a]芘土样悬浊液经灌胃给予每只实验动物，在样品达到预定的体内代谢时间点0.25、0.5、1、2、4、6、12、24小时后，分别于各时间点随机选取部分实验动物，进行血液采样，各时间点采样所选取的实验动物不重复；

另外选取与实验组等量的实验动物作为对照组，经灌胃给予每只实验动物相同剂量的苯并[a]芘标准品油溶制剂，灌胃之后分别于0.25、0.5、1、2、4、6、12、24小时的时间点，分别随机选取部分实验动物，进行血液采样，各时间点采样所选取的实验动物不重复。

5.根据权利要求1所述土壤中苯并[a]芘环境健康风险测评方法，其特征在于，所述的步骤S4，采集血样并制备为待检测样品，具体包括如下步骤：

将两组实验动物经口暴露到设定的时间点后，分别采集血样，所有血样样品采集使用添加抗凝剂的采血管，单次单体采集容量1mL的新鲜血液后充分摇匀，静置后，于低温离心机离心取上层液置于棕色玻璃瓶中，旋紧内置聚四氟乙烯垫的瓶盖；然后将所有瓶装样品在-20℃温度下冰冻保存待用。