[发明专利]一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法在审

专利信息
申请号: 202110981858.0 申请日: 2021-08-25
公开(公告)号: CN113667652A 公开(公告)日: 2021-11-19
发明(设计)人: 张修文;刘俊玲;孙慧婷;郑亚峰;刘素芬;闵逸飞;史轶超 申请(专利权)人: 常州市第二人民医院
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12N1/38;C12R1/19
代理公司: 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 代理人: 周新楣
地址: 213000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 sod3 可溶性 表达 活性 方法
【权利要求书】:

1.一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,包括如下步骤:在培养基中添加Fe3+,培养SOD3宿主细胞。

2.根据权利要求1所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述培养基为LB液体培养基。

3.根据权利要求2所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述培养基中Fe3+的浓度为500~1000μM,所述Fe3+添加时采用FeCl3

4.根据权利要求3所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述培养的过程为:将SOD3宿主细胞在23~27℃下培养至OD600为0.38~0.42,加入IPTG诱导剂,继续培养4~6h。

5.根据权利要求4所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述SOD3宿主细胞为含有原核表达载体的大肠杆菌BL21,所述IPTG诱导剂在培养基中的浓度为0.15~0.25mM。

6.根据权利要求5所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述原核表达载体为含有SOD3基因的重组质粒。

7.根据权利要求6所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述质粒为pET-28a(+)质粒。

8.根据权利要求7所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述SOD3基因提取自拟南芥。

9.根据权利要求1~8任意一项所述的一种提高SOD3可溶性表达及酶活性的方法,其特征在于,所述SOD3基因通过上下游引物扩增得到,所述上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示,所述下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示。

10.Fe3+在增加SOD3可溶性表达及提高酶活性中的应用。

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