[发明专利]瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法及应用

说明书

本发明提供了一种瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法及应用，该检测方法包括如下步骤：采用UPLC‑MS/MS检测待测血浆样品中鸟苷和腺苷的含量；色谱条件：以硅胶颗粒为填料的反相色谱柱；流动相A：含0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱。本发明通过限定UPLC‑MS/MS方法中的参数，各参数之间相互配合，可同时测定瓜蒌薤白半夏剂中鸟苷和腺苷2种入血成分的含量，且简单快捷、准确可靠、灵敏度高、专属性好、稳定性好。

技术领域

本发明涉及药物体内代谢技术领域，尤其涉及一种瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法及应用。

背景技术

经典名方瓜蒌薤白半夏汤出自《金匮要略》，由瓜蒌、薤白、半夏和米酒共煎制成，临床上广泛用于治疗心绞痛型冠心病、风湿性心脏病、室性心动过速、肋间神经痛、乳腺增生、慢性阻塞性肺病、创伤性气胸、老年咳喘、慢性支气管肺炎、慢性胆囊炎等。

目前对于瓜蒌薤白半夏汤的研究主要集中在化学成分的研究，而瓜蒌薤白半夏汤中发挥功效的药效物质基础还不是太清楚，而且有效成分在血液中的检测手段更是空白。

众所周知，中药有效成分在进入人体血液后才能发挥疗效，微量的有效成分如何在复杂的基质条件下进行定量检测成为难题，为了进一步深入研究瓜蒌薤白半夏剂及其有效成分在血液中的变化情况，并为瓜蒌薤白半夏剂中发挥功效的药效物质基础提供科学依据，开发一种准确、可靠的瓜蒌薤白半夏剂入血成分的定量检测方法成为目前亟待解决的技术问题。

发明内容

针对目前没有关于瓜蒌薤白半夏剂入血成分的定量检测方法的缺陷，本发明提供一种瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法及应用，该定量检测方法能够为进一步筛选经典名方瓜蒌薤白半夏剂的质量标志物和药效物质基础提供依据。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法，包括如下步骤：

采用UPLC-MS/MS检测待测血浆样品中鸟苷和腺苷的含量；

其中，色谱条件：以硅胶颗粒为填料的反相色谱柱；流动相A：含0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；梯度洗脱的程序如下：

0-1.5min，95％流动相A，5％流动相B；

1.5-2.0min，95％→80％流动相A，5％-20％流动相B；

2.0-2.5min，80％→50％流动相A，20％-50％流动相B；

2.5-3.5min，50％-95％流动相A，50％-5％流动相B；

3.5-5.0min，95％流动相A，5％流动相B；

上述百分比均为体积百分比。

本发明通过限定UPLC-MS/MS方法中的分析参数，各参数之间相互配合，可同时测定瓜蒌薤白半夏剂中鸟苷和腺苷2种入血成分的含量，该瓜蒌薤白半夏剂中2种入血成分的同时定量检测方法简单快捷、可靠、灵敏度高、专属性好、准确度好、稳定性好、检测限和定量限更低，将该方法应用于药物动力学研究，通过分析多组分在体内吸收的特征，验证其对质量标准的制定与评价具有重要意义。

其中瓜蒌薤白半夏剂包括瓜蒌薤白半夏汤、瓜蒌薤白半夏冻干粉、瓜蒌薤白半夏膏等，瓜蒌薤白半夏冻干粉和瓜蒌薤白半夏膏等剂型均由瓜蒌薤白半夏汤经常规工艺加工而成。

可选地，所述瓜蒌薤白半夏剂的制备方法如下：

取瓜蒌，薤白和半夏，加入米酒煎煮、过滤，按照常规工艺制得瓜蒌薤白半夏剂，如汤剂、膏剂或冻干粉。