[发明专利]一种检测四臣止咳颗粒入血化学成分的方法

权利要求书

1.一种检测四臣止咳颗粒入血化学成分的方法，其特征在于，包含如下步骤：

采集动物在未饲喂四臣止咳颗粒前的血液样本作为对照组；

给予动物四臣止咳颗粒，预定时间后收集所述动物的血液样本作为实验组；

采用液相色谱-质谱法对所述实验组和所述对照组的血液样本进行检测，基于所得到的液相色谱结果确定四臣止咳颗粒入血化学成分；

进行所述检测之前，预先将所述血液样本进行如下处理：

将所述血液样本与乙腈混合，将所得混合液进行第二离心，收集上层液；

将所述上层液进行干燥，将所得干燥物用甲醇复溶，得到复溶液；

将所述复溶液进行第三离心，收集上清液，将所述上清液进行所述检测；

所述液相色谱的色谱条件中采用的流动相包括：

流动相A，所述流动相A选自甲酸水溶液，所述甲酸水溶液的浓度为0.05~0.2体积%；

流动相B，所述流动相B选自乙腈；

所述色谱条件中采用的梯度洗脱程序为：0~9 min，5-95%所述流动相B；9~12 min，95-5%所述流动相B；

所述色谱条件中采用的色谱柱为Cortecs C18色谱柱，所述色谱柱的粒径为100mm×2.1mm×1 .6μm，流速0.2-0.4 mL/min，柱温20-40℃，温度为2-5℃，进样体积2 μL；

所述质谱的条件如下：

采集模式为MRM模式；

毛细管电压在负离子模式下为2.5 kV，在正离子模式下为3.0 kV；

离子源温度150℃，脱溶剂气温度500℃，脱溶剂气流速1000L/Hr；

所述四臣止咳颗粒入血化学成分包含：

胡麻属苷、山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯、毛蕊花糖苷、甘草苷、新甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸、绿原酸、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、岩白菜素、熊果苷、甘草次酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙腈的用量为所述血液样本体积的2-5倍。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二离心是在10000-15000 r/min的转速下进行10-20 min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第三离心是在10000-15000 r/min的条件下进行5-10 min。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，采用口服方式给予动物所述四臣止咳颗粒，给药方式为每天2-3次，连续给药3-7天。

6.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，含药血浆分别在末次给药后0.5、1、2、4、6h进行采集。

7.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，四臣止咳颗粒提取物的制备方法包含如下步骤：

将四臣止咳颗粒进行研磨后，加水稀释，然后进行第一离心取上清液，制得所述四臣止咳颗粒提取物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述第一离心的次数至少为两次，每次离心后均取上清液。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述第一离心是在10000-15000 r/min的条件下进行10-20 min。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述四臣止咳颗粒g：所述水mL=1：（3-7）。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，有效成分的保留时间、离子对、锥孔电压和碰撞能量见下表：

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