[发明专利]一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法及其应用

说明书

本申请公开了分离提取技术领域中一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法，包括回流提取、溶剂萃取、硅胶中压柱色谱分离以及高效液相色谱分离，最终得到呋喃酮类化合物，结构式如下所示，MTT活性测试显示该呋喃酮类化合物对人胰腺癌SW1990细胞具有很强的细胞毒活性，其IC50为2.520μg/mL。AO/PI双重荧光染色高剂量组晚期凋亡细胞数目明显增多，表明该呋喃酮类化合物能够促进人胰腺癌SW1990细胞凋亡，可用于制备潜在抗癌药物。

技术领域

本发明涉及分离提取技术领域，具体为一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法及其应用。

背景技术

老鹰茶樟科木姜子属植物毛豹皮樟(Litsea coreana Lévl.var.lanuginosa(Migo)Yang et P.H.Huang)的嫩梢与叶，为一种药食同源草本茶，广泛分布于贵州、云南、四川等地，并且在贵州习水、务川、息烽、湄潭和开阳等地的偏远山村居民还保留老鹰茶饮用的习惯。《本草纲目》中记载老鹰茶具有“止咳、祛痰、平喘、消暑解渴”功效，现代研究证明老鹰茶具有抗氧化、降糖、降脂、抗炎、抗菌、抗病毒等功效，具有较大的开发应用前景。

现如今对于老鹰茶中化学成分的研究，主要是黄酮类、多酚类、二氢芪苷类等化合物，或者如中国专利CN108707133 A提到的一种木脂素类化合物及其从老鹰茶中提取分离的方法与应用，但是未曾有从老鹰茶中分离得到具有抗癌活性呋喃酮类成分的相关报道。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，设计一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法。

本发明的目的之一是提供一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法，所述呋喃酮类化合物的化学结构式为：

提取分离的步骤如下所示：

1)取老鹰茶地上部分，经干燥、粉碎后，用浓度90％的甲醇回流提取3～4次，每次提取3～4h，合并每次提取后过滤得到的提取液，减压浓缩得到甲醇浸膏；

2)将1)中所得甲醇浸膏分散于水后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取3～4次，减压浓缩得到各萃取部份浸膏；

3)将2)中乙酸乙酯萃取部份浸膏通过柱层析法分离，用石油醚-乙酸乙酯以9:1、4:1、3:2、2:3、1:4和1:0体积比进行梯度洗脱，分为6个组分；

4)将3)中的石油醚:乙酸乙酯＝3:2部分利用HPLC进行分析，合并，再次利用柱层析法分离，色谱分离，用石油醚-乙酸乙酯以9:1、4:1、3:2、2:3、1:4和1:0体积比进行梯度洗脱，分为5个亚组分；

5)将4)中得到的第2～3亚组分利用MCI拌样，去除色素，再次分离，得到10个亚组分；

6)将5)中得到的第8～10亚组分通过制备HPLC分离，检测波长210nm～280nm，流速2.0mL/min～20mL/min，用浓度85％～100％的甲醇等度洗脱，得到呋喃酮类化合物。

进一步的，步骤6)中检测波长为210nm～280nm，流速为2.0mL/min～20mL/min。

进一步的，步骤6)中使用浓度为90％～100％的甲醇梯度洗脱。

进一步的，步骤6)中色谱柱用C₁₈，10μm，10mm×250mm，流速为20mL/min。

本发明首次从老鹰茶中提取到具有抗癌活性的呋喃酮类成分，并且提供的制备方法，工艺简单，分离方法可控性，重现性好，成本低，操作简单，适于推广应用。

本发明的目的之二是提供上述提取方法提取的呋喃酮类化合物在制备抗癌药物中的用途。