[发明专利]一种提高钙质土壤中有机磷提取率以及液相31P-NMR检测效果的方法

说明书

本发明公开了一种提高钙质土壤中有机磷提取率以及液相³¹P‑NMR检测效果的方法。所述钙质土壤中有机磷的提取方法包括如下步骤：S1、将酸加入至钙质土壤中进行反应，用水洗涤后得到沉淀物；S2、向经冻干后的沉淀物中加入Na₂EDTA‑NaOH提取剂进行提取，依次经振荡、离心和过滤得到有机磷提取液，即实现钙质土壤中有机磷的提取；所述酸为盐酸、硝酸和硫酸中任一种；所述酸的浓度为1.44M、2.88M、4.32M或5.78M。与现有技术相比，本发明方法具有如下有益效果：（1）可显著提高钙质土壤的有机磷提取量，尤其是磷酸单酯。（2）可提高NMR谱图有机磷特征峰的识别程度。

技术领域

本发明涉及一种提高钙质土壤中有机磷提取率以及液相³¹P-NMR检测效果的方法，属于面向环境分析技术领域。

背景技术

有机磷是植物的重要磷源，尤其随着全球磷矿资源的不断减少而日益受到重视。土壤有机磷的形态信息对于理解有机磷素有效性和发掘有机磷库供农业生产所需的前提。但目前对其化学结构及其生物有效性仍然知之甚少，其主要原因是由于分析方法上的局限性。³¹P-NMR技术为土壤中有机磷的表征和鉴定提供了有力的手段，然而测试前必须从土壤中提取有机磷，才能对其进行量化和鉴定，以便于后续形态和生物有效性的研究。土壤有机磷化学表征的理想萃取剂应最大程度地提高回收率，同时尽量减少化学结构的改变。

当前应用最广泛的提取方法是EDTA-NaOH一步提取法，碱性溶剂中EDTA通过螯合金属阳离子提高了土壤有机磷的提取率。但对于钙质土壤，其含有大量可溶性钙离子，在用碱溶液进行提取时易生成钙盐沉淀，进而导致有机磷固定而降低有机磷提取率。因此，有必要改进钙质土的有机磷提取率方法，这对准确的评估钙质土中磷储量、形态及其生物有效性具有重要的实际意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高钙质土壤中有机磷提取率以及液相³¹P-NMR检测效果的方法，本发明方法对钙质土进行酸化预处理，通过使可溶性碳酸钙离子化，再用超纯水清洗由此可将土壤中大量钙离子去除；然后采用EDTA-NaOH溶液进行提取，提取液冻干后用碱溶液进行复溶，从而提高钙质土有机磷提取率，并在溶液³¹P-NMR中获得更佳的光谱分辨率。

本发明首先提供一种钙质土壤中有机磷的提取方法，包括如下步骤：

S1、将酸加入至钙质土壤中进行反应，用水洗涤后得到沉淀物；

S2、向经冻干后的所述沉淀物中加入Na₂EDTA-NaOH提取剂进行提取，依次经振荡、离心和过滤得到有机磷提取液，即实现所述钙质土壤中有机磷的提取；

可采用0.5~1ml有机磷提取液，经稀释后用于有机磷含量的测定；

所述Na₂EDTA-NaOH提取剂指的是Na₂EDTA与NaOH的混合水溶液。

上述的提取方法中，步骤S1中，所述酸为盐酸、硝酸和硫酸中任一种，优选盐酸；

所述酸的浓度为1.44M、2.88M、4.32M或5.78M，优选2.88M。

所述钙质土壤与所述酸的质量配比为1：5~10，优选为1：8；

上述的提取方法中，步骤S1中，加入所述酸后，摇晃5~10min，静置至无气泡产生；然后离心10~15min后得到所述沉淀物；

采用水洗涤所述沉淀物至中性。

上述的提取方法中，步骤S2中，所述Na₂EDTA-NaOH提取剂中，所述Na₂EDTA的摩尔浓度可为0.01~0.1M，优选为0.05M，所述NaOH的摩尔浓度为0.1~0.5M，优选为0.25M。

上述的提取方法中，步骤S2中，所述提取的条件如下：