[发明专利]生物素标记缓冲液

说明书

本发明涉及一种生物素标记缓冲液，属于生物材料技术领域。本发明的生物素标记缓冲液包括以下组分：十二水合磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、三水合磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾；制得的生物素标记缓冲液的pH值为7.2～7.6；缓冲液每1L溶解有十二水合磷酸氢二钠6～6.4g、二水合磷酸二氢钠0.6～0.9g、三水合磷酸氢二钾4～4.4g、磷酸二氢钾0.4～0.6g、氯化钠0.6～0.8g、氯化钾0.6～0.8g。本发明的生物素标记缓冲液的离子强度及缓冲环境使得抗体更加稳定，抗体与生物素更容易结合，使用更低剂量的生物素即可与抗体完成标记，效率较常规标记缓冲液更高。生物素标记缓冲液标记的重复性高于常规标记缓冲液，且具有背景低、信噪比高的优势。

技术领域

本发明涉及一种生物素标记缓冲液，属于生物材料技术领域。

背景技术

抗体可经过酶标记、荧光素标记或通过生物素标记获得标记抗体，是用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后，不影响后者的免疫活性，但用酶标记时则结果有不同。因此近年来，生物素化的抗体在临床检测和免疫实验中的使用需求迅速增长。抗体生物素化目前主要是通过加入活化的生物素来实现，但是生物素与抗体在标记过程中常出现标记效率低的问题，通常需要大剂量的生物素用来标记抗体才可完成标记。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生物素标记缓冲液，可提高生物素标记抗体的效率，即添加更少的生物素用以完成抗体标记。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：一种生物素标记缓冲液，所述生物素标记缓冲液包括以下组分：十二水合磷酸氢二钠、二水合磷酸二氢钠、三水合磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾；

所述生物素标记缓冲液的pH值为7.2～7.6；

其中，所述生物素标记缓冲液每1L水溶剂中溶解有所述十二水合磷酸氢二钠6～6.4g、二水合磷酸二氢钠0.6～0.9g、三水合磷酸氢二钾4～4.4g、磷酸二氢钾0.4～0.6g、氯化钠0.6～0.8g、氯化钾0.6～0.8g。

进一步地，所述生物素标记缓冲液中还包括表面活性剂Tritonx～100及Tween20，所述生物素标记缓冲液每1L水溶剂中溶解有Tritonx～100 0.3mL、及Tween20 0.2mL。

进一步地，所述水溶剂为体外诊断试剂用纯化水。

进一步地，所述生物素标记缓冲液使用的生物素为生物素～X～X～NHS，所述生物素～X～X～NHS为生物素～6～(生物氨基己酰氨基)己酸N～羟基琥珀酰亚胺酯。

进一步地，在使用所述生物素标记抗体时，所述抗体溶解在所述生物素标记缓冲液中，并在2℃～8℃环境下透析16h。

进一步地，所述抗体溶于所述生物素标记缓冲液的浓度为1.0～4.0mg/mL。

进一步地，将所述生物素溶解在含有所述抗体的生物素标记缓冲液中，于18～37℃中反应1h。

进一步地，所述生物素和所述抗体的摩尔比为1:5～1:10。

进一步地，所述生物素的溶剂为有机溶剂或者水溶液，所述有机溶剂为二甲基甲酰胺、二甲亚砜、吡啶中的一种或多种。

进一步地，所述生物素标记抗体后需在20mmol/L磷酸盐缓冲液中透析纯化。

本发明的有益效果在于：生物素标记缓冲液为低离子浓度缓冲液，该缓冲液中，离子强度及缓冲环境使得抗体更加稳定，抗体与生物素更容易结合，从而使得标记使用的生物素与抗体之间比例更低，即使用更低剂量的生物素与抗体完成标记，生物素标记抗体的效率更高。且本发明的生物素标记缓冲液标记的重复性高于常规标记缓冲液，且具有背景低、信噪比高的优势。