[发明专利]一种杜梨变异新品种的诱变方法

说明书

本发明公开了一种杜梨变异新品种的诱变方法，包括以下步骤：春季树木发芽前，在杜梨母树上采集1年生木质化枝条，将枝条裁剪接穗，保持剪口平整，在接穗下芽背面1cm处斜削1刀形成长削面，再在长削面的背面斜削一小削面，接穗上保留3个完整、饱满的芽；在砧木距地面5cm处截断主干，将切面削平，在皮层内略带木质部处垂直下切3cm；制备叠氮化钠溶液，将接穗在叠氮化钠溶液中浸泡处理，取出并插入到砧木的切口内；将吸附有叠氮化钠溶液的棉球包裹在接穗与砧木的连接处，采用塑料条绑紧，诱变处理一个月，杜梨叶片逐渐出现变异，叶片变异明显，将有变异性状的植株进行常规管理。该方法操作简单，植株诱变率高，诱变效果好。

技术领域

本发明涉及农业技术领域，具体涉及一种杜梨变异新品种的诱变方法。

背景技术

杜梨(Pyrus betulaefolia Bunge)是蔷薇科梨属乔木，是最古老的梨属物种之一。由于杜梨根系发达、适应环境能力极强，具有抗寒、抗涝、耐旱和耐盐等优良特性，是我国三北防护林主要造林树种。此外，杜梨是常用的园林绿化树种，其木材质地坚硬，是很好的用材树种，具有极高的经济开发利用价值。

NaN₃是一种点突变剂，在DNA合成开始时，以碱基替换方式影响DNA的正常合成，从而导致点突变的产生。NaN₃具有高效、无毒、价格便宜及使用安全等优点，因此成为一种高效的化学诱变剂，目前应用于大麦、小麦、水稻、烟草、菊花等许多作物的诱变育种中，并取得了非常好的诱变效果。在以往的研究中，大多采用NaN₃处理植物种子，该方法诱变过程较为复杂，周期长。目前国内对杜梨的研究主要集中在生物学特性、育繁技术、打破种子休眠等方面，对杜梨的新品种选育研究较少，且未对杜梨树种种质资源开展系统研究，仍处于较低利用层次的常规育种阶段。因此，如何利用人工诱导突变体来获得杜梨新种质资源的研究具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一种杜梨变异新品种的诱变方法，本发明采用叠氮化钠溶液对嫁接后的杜梨的组培体系进行诱变处理，在处理时，不仅采用叠氮化钠溶液浸泡接穗，还在接穗和砧木的连接处包裹吸附叠氮化钠溶液的的棉球，有效提高了诱变率，本发明还在棉球表面包裹自制的多层功能薄膜，提供植株生长期所需的影响，在不影响诱变率的前提下，有效降低了植株的死亡率，本发明公开的诱变方法操作简单，诱变效果好。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种杜梨变异新品种的诱变方法，包括以下步骤：

(1)春季树木发芽前，在生长健壮的优良杜梨母树上，采集直径为1±0.2cm的1年生木质化枝条，将枝条裁剪成长为15±1cm的接穗，保持剪口平整，在接穗下芽背面1cm处斜削1刀，削去1/3木质部，形成长削面，再在长削面的背面斜削一小削面，接穗上保留3个完整、饱满的芽；

(2)在砧木距地面5cm处截断主干，将切面削平，在皮层内略带木质部处垂直下切3cm；

(3)制备质量浓度为0.045-0.055％的叠氮化钠溶液，将接穗在叠氮化钠溶液中浸泡处理，然后将浸泡后的接穗插入到砧木的切口内，使得接穗的长削面的形成层和砧木的切口的形成层对齐、靠紧；

(4)将吸附有叠氮化钠溶液的棉球包裹在接穗与砧木的连接处，然后用塑料条把连接处绑紧，进行诱变处理，经过诱变处理一个月后，杜梨叶片逐渐出现变异，叶色开始变黄，变异稳定后叶色变小、变厚，叶色变黄或形成斑色叶，将有变异性状的植株进行常规管理，并喷洒营养液补充营养，促进植株发育。

作为上述技术方案的优选，步骤(1)中，所述长削面的长度为2±0.01cm，小削面的长度为0.8±0.01cm。

作为上述技术方案的优选，步骤(3)中，所述叠氮化钠溶液的质量浓度为0.05％。

作为上述技术方案的优选，步骤(3)中，所述浸泡处理的时间为0.5-1.5min。