[发明专利]一种藻蓝蛋白快速提取方法

权利要求书

1.一种藻蓝蛋白快速提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤(1)将含有微藻的养殖水与蛋白保护剂混合，经第一离心，得到浓缩藻液；所述蛋白保护剂为叠氮钠；

步骤(2)将浓缩藻液与细胞冷冻保护剂混合，经反复冻融，得到解冻后的浓缩藻液；所述细胞冷冻保护剂为丙三醇；

步骤(3)将解冻后的浓缩藻液与蛋白保护剂、表面活化剂混合，进行细胞破碎，得到破碎后的藻液；所述表面活化剂为吐温80和陶氏DF104聚醚消泡剂；

步骤(4)将破碎后的藻液进行第二离心，得到上清液；

步骤(5)将上清液与硫酸铵、聚丙二醇混合，搅拌；

步骤(6)将搅拌好的料液进行第三离心，得到沉淀；

步骤(7)将所得沉淀用乙醇水溶液清洗，经第四离心，将沉淀物进行冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)，在含有微藻的养殖水中，所述蛋白保护剂的加入量为0.1～0.5mg/L。

3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述第一离心的转速5000～10000rpm，所述浓缩藻液的含水量为50％～70％。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(2)，在浓缩藻液中，所述细胞冷冻保护剂的加入量为5～10g/kg。

5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述反复冻融的程序为：-20～-10℃冷冻12～24h，10～30℃解冻6～12h，重复2～3次。

6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(3)，在解冻后的浓缩藻液中，所述蛋白保护剂的加入量为1～2mg/L，所述吐温80的加入量为1～5mL/L，所述陶氏DF104聚醚消泡剂的加入量为1～2mL/L。

7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述第二离心的转速为2000～3000rpm，时间为40～60min。

8.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤(5)，在上清液中，硫酸铵的加入量为10～15g/L，聚丙二醇的加入量为5～30mL/L；

所述搅拌的转速为500～1000rpm，时间为1～2h。

9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述第三离心的转速为5000～10000rpm，时间为20～40min。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的提取方法，其特征在于，所述乙醇水溶液的浓度为20％～50％；

所述第四离心的转速为5000～10000rpm，时间为20～40min。