[发明专利]一种适于捕获稀有细胞的涂层组合物、装置及方法

说明书

本发明公开了一种适于捕获稀有细胞的涂层组合物、装置及方法。一种适于捕获稀有细胞的装置，其包括基材、设于所述基材表面的涂层及连接于所述涂层的捕获物，所述捕获物能够特异性地和目标细胞结合，所述涂层包括巯基化物，所述涂层还包括含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物，所述涂层由如下步骤制得：将所述基材浸于含有所述巯基化物和所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物的涂层组合物中，取出，干燥，形成所述涂层；所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物和所述巯基化物的重量比为1:2至6:1之间。本发明能够降低背景细胞、蛋白的非特异性吸附，提高所捕获的靶细胞的纯度。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种适于捕获稀有细胞的装置及方法，还涉及一种适于捕获稀有细胞的装置的涂层组合物。

背景技术

稀有细胞是指生物样本中存在的数量稀少却具有重要生物学功能或临床检测意义的细胞。稀有细胞的传统捕获方法有CellSearch类的免疫捕获富集、物理富集等。在稀有细胞的富集过程中，背景/杂细胞干扰稀有细胞的捕获及判断，同时影响到捕获到稀有细胞的纯度。目前，一些捕获筛等捕获装置上添加有物理涂层和化学涂层来提高细胞的捕获效率，其中，物理涂层的结合强度低；而化学涂层不可逆，捕获的稀有细胞释放困难；另一方面，在捕获靶细胞的同时，背景细胞也会吸附到捕获筛上，所捕获的稀有细胞的纯度较低；此外，捕获装置会对稀有细胞有不同程度的损伤；这些因素都会影响捕获细胞的活性及下游应用。

上海邦先医疗科技有限公司于2020年提出了一种捕获筛，参见CN111175503A，该捕获筛包括筛网骨架和设置于所述筛网骨架上的捕获物，所述捕获物能够与目标细胞或生物分子特异性结合，所述筛网骨架具有金属原子，所述的筛网骨架和所述捕获物之间通过巯基化物质连接，其中巯基化物质与所述筛网骨架通过反应形成金属-硫键而结合，巯基化物质与所述捕获物通过反应形成酰胺键而结合；所述巯基化物质为巯基化海藻酸钠和巯基化透明质酸中的一种或两种的组合。该捕获筛能够方便地将捕获的细胞洗脱，但是用于富集稀有细胞时，背景细胞也会吸附到捕获筛上，捕获的目标稀有细胞的纯度较低。

发明内容

针对上述技术问题中的至少一个，本发明的第一个目的是提供一种适于捕获稀有细胞的装置，该装置能够降低背景细胞、蛋白的非特异性吸附，提高所捕获的靶细胞的纯度。本发明的另一个目的是提供一种适于捕获稀有细胞的方法，该方法能够降低背景细胞、蛋白的非特异性吸附，提高所捕获的靶细胞的纯度。本发明的又一个目的是提供用于这种装置的涂层组合物，该涂层组合物形成的涂层能够降低背景细胞、蛋白的非特异性吸附。

本发明的第一个方面提供一种适于捕获稀有细胞的装置，其包括基材、设于所述基材表面的涂层及连接于所述涂层的捕获物，所述捕获物能够特异性地和目标细胞结合，所述涂层包括巯基化物，所述涂层还包括含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物，所述涂层由如下步骤制得：将所述基材浸于含有所述巯基化物和所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物的涂层组合物中，取出，干燥，形成所述涂层；所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物和所述巯基化物的重量比为1:2至6:1之间。

优选地，所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物和所述巯基化物的重量比为1：1至6：1之间，进一步为1：1至5：1之间，更进一步为1：1至4：4之间。将含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物和巯基化物的重量比控制为1:2至6:1之间，能够有效降低背景细胞的吸附，且不会对目标稀有细胞造成损伤。

优选地，所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物包括选自双马来酰亚胺基-聚乙二醇和四臂聚乙二醇-马来酰亚胺中的一种或两种。

优选地，所述含有马来酰亚胺或双键基团的高分子化合物包括甲基丙烯酰化明胶、甲基丙烯酰化透明质酸、甲基丙烯酰化海藻酸钠和甲基丙烯酰化葡聚糖中的一种或多种的组合。

优选地，所述巯基化物包括巯基化透明质酸钠或巯基化海藻酸钠。该涂层可被裂解，从而便于将捕获到的细胞从基材上洗脱下来，且不会损伤到细胞，具有较高的洗脱效率。