[发明专利]一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用

说明书

本发明属于中药检测技术领域，具体提供了一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用，该薄层色谱的构建方法包括如下步骤：猫爪草供试品溶液的制备：取猫爪草供试品、水与无机酸混合，加热水解，用有机溶剂提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供试品溶液；对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱，使用上述构建方法不仅操作步骤简便，耗时短，溶剂种类且用量少，节约成本、易于推广应用；而且供试品溶液中的多种成分很好的分离，使得薄层检测中斑点分离效果好，清晰，能够显出多个斑点，使得鉴别过程更加快速方便、鉴别结果更加准确可靠。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种薄层色谱的构建方法和鉴定方法及其应用。

背景技术

猫爪草来源为毛莨科植物小毛莨Ranunculus ternatus Thunb.的干燥块根，具有清热解毒、软坚化痰、散结消肿、截疟等功效。猫爪草主要含有糖类、脂类、氨基酸、黄酮和苷类等成分，具有抗结核菌、抗肿瘤、镇咳、祛痰、消炎等临床应用。

目前，猫爪草的药典质量标准中薄层鉴别主要针对其中的氨基酸成分，但在猫爪草标煎冻干粉中难以检测，无法定性考察猫爪草成分在药材、饮片、水提物中的传递性；现有技术中，猫爪草也未检索出对配方颗粒的薄层鉴别方法，因而，无法评价猫爪草从药材、饮片到猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒工艺过程是否稳定存在。

例如，杨志芬公开了一种猫爪草的鉴别方法，陈赤等公开了一种野生与野生抚育猫爪草药材的分析比较方法，上述两种方法仅能够对猫爪草药材进行鉴别，难以实现对猫爪草标准汤剂冻干粉、配方颗粒物质成分的定性鉴别。

因此，亟需建立一种能够同时应用于猫爪草药材、饮片、猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒中猫爪草成分的定性鉴别方法，以作为猫爪草从药材、饮片到猫爪草标准汤剂冻干粉及猫爪草配方颗粒工艺过程稳定性的定性评价方法之一。

发明内容

因此，本发明的目的在于解决现有技术中的方法无法同时应用于鉴定猫爪草药材、饮片和猫爪草药物制剂中猫爪草成分的问题。

为此，本发明提供了一种薄层色谱的构建方法，包括如下步骤：

猫爪草供试品溶液的制备：取猫爪草供试品、水与无机酸混合，加热水解，用有机溶剂提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供试品溶液；

对供试品溶液进行薄层色谱检测，即得供试品的薄层色谱。

所述薄层色谱检测包括如下步骤：

(1)取猫爪草供试品溶液在薄层板上点样；

(2)采用环己烷-乙酸乙酯-甲酸的混合液为展开剂展开，取出，溶剂挥发，显色，即得。

进一步的，采用的薄层板为硅胶G薄层板；

优选的，薄层板的长度≥10cm，更优选为10-20cm；

优选的，点样体积为1-30μl；更优选为1-4μl。

进一步的，薄层色谱检测中，采用紫外下显色或者硫酸乙醇溶液为显色剂显色。具体的，可以采用含体积百分数为10％的硫酸的乙醇溶液。

在某些优选的实施方式中，采用365nm的紫外下显色。

进一步的，所述猫爪草供试品溶液的制备中，满足如下a-g中的任意一项或者多项：

a，所述猫爪草供试品的质量与水、无机酸的体积之比为0.3-0.7：20-50：1-3，其中，若质量的单位为g，对应的体积的单位为ml。

b，所述猫爪草供试品的质量与有机溶剂的体积比为0.3-0.7：30-60，其中，若质量的单位为g，对应的体积的单位为ml。

c，加热水解的温度为90-100℃，时间为0.5-2h。