[发明专利]通过检测肺泡灌洗液及血清白蛋白来评估急性呼吸窘迫综合征/急性肺损伤及预后的试剂盒

说明书

本发明公开了一种通过检测肺泡灌洗液及血清白蛋白来评估急性呼吸窘迫综合征/急性肺损伤及预后的试剂盒，属于试剂盒领域。本发明首次发现ALI小鼠的BA/SA比值显著高于健康小鼠，因此，通过检测小鼠的BA/SA比值，能够实现有效筛查ALI小鼠的目的；本发明首次发现BA/SA比值与肺部液体清除率显著负相关，利用BA/SA比值能够有效评估小鼠肺部液体清除率，筛查肺部液体失衡小鼠；本发明首次发现ARDS患者的BA/SA比值显著高于健康对照者，因此，通过检测BA/SA比值能够有效筛查ARDS患者，并对其预后进行评估。本发明的试剂盒可以通过检测血清及肺泡灌洗液中白蛋白，客观、准确、快速的实现ARDS/ALI筛查、肺部液体失衡筛查及其预后评估，应用前景良好。

技术领域

本发明属于试剂盒领域，具体涉及一种用于筛查急性呼吸窘迫综合征/ 急性肺损伤、评估急性呼吸窘迫综合征/急性肺损伤预后、筛查肺部液体失衡、评估肺部液体失衡预后的试剂盒，及其用途。

背景技术

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由肺内原因和/或肺外原因引起的，以顽固性低氧血症为显著特征的临床综合征，因高病死率而倍受关注。既往ARDS也被称为急性肺损伤(ALI)，2012年，柏林定义将ARDS用于临床(Acute respiratory distress syndrome:theBerlin Definition，JAMA，2012，307(23):2526-2533)，而ALI主要用于模拟ARDS的动物模型及基础研究。失控性炎症反应及肺部液体异常集聚是ALI/ARDS的核心病理生理改变，而准确评估 ARDS/ALI肺部液体失衡，能够为ARDS/ALI诊治、预后评估及研究提供重要的评价值指标和参考体系。

在肺内外致病因素的作用下，肺微血管内皮细胞间紧密连接蛋白表达及功能均被抑制，内皮屏障功能减弱，血管内富含蛋白的液体大量外渗至肺泡腔及肺间质(Cyclicstretch-induced oxidative stress increases pulmonary alveolar epithelialpermeability.Am J Respir Cell Mol Biol.2013；49(1):156-64)，同时，肺泡上皮细胞中环磷酸腺苷表达下调，离子通道蛋白(包括钠离子通道，钠钾ATP酶等)表达及功能受损，肺泡液体重吸收障碍(Acute Lung Injury:A Clinical and Molecular Review.ArchPathol Lab Med.2016；140(4):345-50)。二者共同作用，导致肺部液体失衡，集聚形成肺水肿，大量集聚的高蛋白液体减少了肺泡有效呼吸面积，进一步加重炎性反应，促进ARDS/ALI发生(he acute respiratory distress syndrome:from mechanism to translation.JImmunol.2015；194(3):855-60)。既往研究利用荧光标记的白蛋白，可以较为准确的评估小鼠肺部液体重吸收(alveolarfluidclearance,AFC)能力(p0.01)(Resolvin D1Stimulates Alveolar Fluid Clearance through Alveolar Epithelial SodiumChannel,Na,K-ATPase via ALX/cAMP/PI3K Pathway in Lipopolysaccharide- InducedAcute Lung Injury.J Immunol.2014；192(8):3765-77)。但目前，如何对 ARDS/ALI肺部液体渗漏进行检测，从而全面准确评估肺部液体失衡，尚无简便稳定的方法。邵卢晶等(6-甲酰基吲哚并[3,2-b]咔唑抑制内质网应激改善脂多糖诱导的急性肺损伤，中华危重病急救医学，2021，33(02))利用小鼠肺组织干湿重比值评估ALI肺部液体失衡，但并未评价该方法对ALI小鼠评估效果的敏感性及特异性，而且该检测方法较为粗糙，受影响因素多，结果稳定性不足。国际上有研究者(Claudin 4knockout mice:normal physiological phenotypewith increased susceptibility to lung injury,American journal of physiologyLung cellular and molecular physiology,2014,307(7):L524-536)将荧光物质通过尾静脉注射入小鼠体内，然后通过检测荧光值来评估小鼠肺部液体集聚，组间比较时P值为0.013，但是该方法较为复杂，尾静脉注射操作难度较大。