[发明专利]基于四面体纳米结构DNA的信号探针、其制备方法和用途

权利要求书

1.一种基于四面体纳米结构DNA的信号探针，其特征在于，所述信号探针包括：正置四面体纳米结构DNA和复合物，所述复合物包括倒置四面体纳米结构DNA和生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构DNA的其中三个顶点均延伸有一个所述生物素修饰的核酸适配体；所述倒置四面体纳米结构DNA的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构DNA的其中一个顶点杂交；所述核酸适配体能与待测循环肿瘤细胞识别并结合；所述正置四面体纳米结构DNA包括A₁、B₁、C₁和D₁四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3 以及SEQ ID NO.4所示；所述倒置四面体纳米结构DNA包括A₂、B₂、C₂和D₂四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7 以及SEQ ID NO.8所示；所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

2.一种电化学生物检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将待测循环肿瘤细胞与复合物一起孵育，得到结合有复合物的待测循环肿瘤细胞；

将正置四面体纳米结构DNA修饰在工作电极表面；

2）使正置四面体纳米结构DNA和复合物中的倒置四面体纳米结构DNA杂交，以将循环肿瘤细胞捕获在工作电极上；

3）加入氧化还原酶和相应的底物，进行电化学检测；

所述复合物包括倒置四面体纳米结构DNA和生物素修饰的核酸适配体，所述核酸适配体能与待测循环肿瘤细胞识别并结合；所述正置四面体纳米结构DNA包括A₁、B₁、C₁和D₁四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3 以及SEQ ID NO.4所示；所述倒置四面体纳米结构DNA包括A₂、B₂、C₂和D₂四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7 以及SEQ ID NO.8所示；所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。

3.根据权利要求2所述的电化学生物检测方法，其特征在于，所述倒置四面体纳米结构DNA的其中三个顶点均延伸有所述生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构DNA的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构DNA的其中一个顶点杂交。

4.根据权利要求2所述的电化学生物检测方法，其特征在于，正置四面体纳米结构DNA通过Au-S键修饰在所述工作电极表面；和/或，所述工作电极为碳电极；和/或，所述工作电极为丝网印刷电极；和/或，采用恒电位沉积法将氯金酸直接还原成纳米金并修饰于工作电极上，然后与正置四面体纳米结构DNA键合。

5.一种电化学生物传感器，其特征在于，包括工作电极、正置四面体纳米结构DNA和复合物，所述正置四面体纳米结构DNA修饰在所述工作电极上；所述复合物包括倒置四面体纳米结构DNA和生物素修饰的核酸适配体；所述倒置四面体纳米结构DNA的其中三个顶点均延伸有一个所述生物素修饰的核酸适配体，所述倒置四面体纳米结构DNA的另一个顶点能与所述正置四面体纳米结构DNA的其中一个顶点杂交；所述正置四面体纳米结构DNA包括A₁、B₁、C₁和D₁四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3 以及SEQID NO.4所示；所述倒置四面体纳米结构DNA包括A₂、B₂、C₂和D₂四条链，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7 以及SEQ ID NO.8所示；所述生物素修饰的核酸适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。